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[交流]
【求助/交流】腺病毒RCA鉴定相关问题
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我鉴定自己包装出来的重组复制缺陷型的adv,看是否含有RCA。具体操作如下: 病毒上清模板的制备: (1)25ul病毒in PBS+1ul蛋白酶K(20mg/ml) (2)55℃水浴1h (3)煮沸5~10min (4)取1ul作为PCR模板(1:0、1:10、1:100梯度稀释) 采用引物是针对E1部分基因,约1.2k所设计的。 结果很奇怪:原液没有1.2k目的条带;随着稀释倍数增大(10倍稀释和100倍稀释)居然有1.2k的条带出现,且亮度随稀释倍数增强。 有没有哪位碰到过类似的现象,望能给出意见,相互交流。谢谢 |
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