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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】甲叉与丙烯酰胺比例
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qingzi8575

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】甲叉与丙烯酰胺比例 已有1人参与

各位大虾：
谁知道配置PAGE胶的时候，丙烯酰胺与甲叉比例分别为19：1 和29：1的时候，有啥区别？
测序胶为啥用19：1
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1楼 2009-12-22 15:12:04
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liudaihualyh

金虫 (小有名气)
★
qingzi8575(金币+1):谢谢参与
SDS Page Gel


ul        5% stock gel（4）        5% stock gel（2）        8% resolving gel(4)        8% resolving gel(2)        10% resolving gel(4)        10% resolving gel(2)
DDW        6800        3400        9200        4600        8000        4000
30%聚丙烯酰胺        1660        830        5400        2700        6600        3300
1.5M Tris （PH8.8）                        5000        2500        5000        2500
1M Tris （PH6.8）        1260        630                               
10％ SDS        100        50        200        100        200        100
10%过硫酸铵（APS）        100        50        200        100        200        100
TEMED(最后加)        10        5        12        6        8        4
一般与跑的分子量有关
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5楼2009-12-25 21:37:14
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lzhwin

木虫 (正式写手)
★
qingzi8575(金币+1):谢谢参与
29：1是做蛋白电泳时的比例，只用过这一个比例
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2楼2009-12-22 15:13:12
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
qingzi8575(金币+1):谢谢参与
我们实验室跑非变性DNA电泳时，用29：1的，然后配成8%浓度的使用。根据资料显示，浓度、交联率不同会使胶孔的大小机械强度不同，不同大小的胶孔起到分子筛的作用，来分离不同分子量的物质。

到网上检索一下，介绍这方面的有挺多文章
http://www.bioon.com.cn/protocol ... 709&typeid=1749
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3楼2009-12-22 15:27:47
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dy_414

木虫 (正式写手)
★
qingzi8575(金币+1):谢谢参与
我们常用的是29.2g的丙烯酰胺和0.8g的甲叉~
赞一下(1人) 回复此楼
我坚信，rp是攒出来的
4楼2009-12-25 15:54:13
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