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zhjiatao

金虫 (初入文坛)

[交流] 询问利用酶比色法及酶联法测定苹果酸浓度的具体方法步骤

请问利用酶比色法及酶联法测定苹果酸浓度的具体方法步骤

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2楼2009-12-22 12:30:43
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mdzhao

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
zhjiatao(金币+3,VIP+0):谢谢你的回复 12-25 10:07
作为测定果蔬生活力状况的化学指标,必须对克雷布斯(Krebs)循环中的中间产物进行调查,特别是柠檬酸和苹果酸。关于果实中这两种酸已经有了不少的文献,可以用不同的分析方法测定,我们选择了酶光谱分析法,因为这种分法快而且明确。我们又发展了一种在不利条件下(例如,运输式抽测),可用来测定苹果酸的酶比色分析法。我们用这种分析法检验了若干种农产品,特别检验了葡萄。

根据莫勃林反应和还原型烟酿胺线嘿吟二核贰酸(NAD)的氧化作用,我们发展了分析苹果酸的比色测定方法。这种氧化作用是和氯化碘硝四陛(INT)发生的。还原型烟酰胺线膘吟二核贰酸(NAD)变为红色的甲潜,在有心肌黄酶的时候,它的吸收光可在492毫微米下测定。当苹果酸的量增加,这种吸收也增加。样品溶液的最后体积为2.33毫升,并包括下列数据:o.6毫升的缓冲溶液,pH8.6,其中包含磷酸钾o.05克分子,三乙醇脓0.2克分子,每一毫升缓冲溶液中有(Trzton×100)0.02毫升,谷氨酸0.1克分子,重蒸馏水l毫升;0.2毫升的溶液,其中包括氧化型烟酰胺线嗓吟二核贰酸(NAD)6.7毫克分子和心肌黄酶12个单位(1毫克/毫升);2.0毫升氯化碘硝四陛(1N了)溶液1.2毫升分子;o.2毫升样品提取物;0.02毫升谷氨酸草醋酸氨基移转酶(GOT)溶液(·2毫克/毫升(和0.0l毫升L——苹果酸盐脱氢酶(MDH)溶液(5毫克/毫升)。在再度蒸馏中,兑入等量的IJ——苹果酸盐脱氢酶(MDH)溶液。苹果酸的数字可用校准图用分光光度分析法测定。

文字识别可能有误,最好看一下原文。见文献:书名: 《第十五届国际制冷大会论文译丛 下册》 ,作者: 《制冷学报》编辑部编 ,第25页:受冷害引起生理病害的水果内的有机酸
3楼2009-12-22 13:27:56
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