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【求助】马上用大孔树脂，有些问题不明白，写下来，请师兄师姐老师们帮忙看下，谢拉
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我是个刚开始做实验的研究生新生，刚刚在实验室把药材用醇浸泡提出来，现在马上要用AB-8大孔树脂富集一种中药的总黄酮（用来做药理，不是做工艺），因为是新手，基本处于什么都不懂的状态，现在把自己思考和不明白的地方写下来，请大家帮帮忙啦，谢啦！～ 1.我从文献上看到的纯化这种中药的总黄酮经过筛选是用AB-8大孔树脂。 2.经过坛子里搜索，确定预处理AB-8大孔树脂的方法是：95%乙醇浸泡过夜，装柱后水洗至无醇味，即可。（实验室是买来没用过的树脂，不知道这样处理行不行？） 3.在坛子里的一个帖子看到，大孔树脂最好湿法装柱，干法上样。但是这里不太理解。这里的干法上样是指将我减压浓缩的药液与一定量的大孔树脂混匀挥干，还是将药液与一定量的硅胶混匀挥干呢？ 4.我减压浓缩时，在一根橡皮管的一头接了一个小漏斗，然后在漏斗上盖了两层纱布放到泡药材的桶里，把橡皮管的另一头接到旋蒸上。这样提出来的药液应该不用过滤了吧。 5.我减压浓缩时最后的浓缩液都很浓，几次下来合并到大瓶子里的药液下面都沉淀了一厚层结晶。我上样的时候应该是把药液一部分一部分稀释出来上样吧。 6.我看文献上研究的工艺还有对上样液浓度的因素，可是黄酮我看书上是难溶于水的吧。我大瓶子里上层的药液都不够文献上的上样浓度，难道我还要再浓缩啊？下层的都是结晶了我到后面还要再稀释一下？好麻烦啊。 7.据说少量乙醇的存在会大大降低树脂的吸附。那我提取合并的药液里面应该还有一定量的乙醇的。因为减压浓缩的时候浓缩到最后太浓的话不容易转移出来，很多都结晶沾到旋转瓶的壁上了，所以后来旋蒸的时候到最后就没敢等醇全部都回收出来，应该有一些，不会太多。不知道现在我应该怎么处理，是不是要再转移到旋蒸的瓶子里再蒸发一下啊，我昏。 8.在坛子里还看到一篇师兄的经验，就是大孔树脂装到柱子里以后从高处引蒸馏水下来接到柱子底部，让水反冲，以出去气泡。我一个师姐说我富集黄酮的话，用自来水就可以，不用用蒸馏水，因为我不做工艺。我不知道这样行不行，还请各位师兄师姐老师解惑。 9.如果我装好柱并且上样量够了，是不是应该先用水洗脱一下柱子，然后再用乙醇浓度从低到高的乙醇对树脂进行洗脱。各种浓度的乙醇上样前先超声一下排走气泡。 10.文献上工艺还要求了上样流速，洗脱速度，洗脱体积这些。都是用柱体积标注的，我是不是要换算成每秒的流速，这样才能大概判断啊。 可能就是以上的东西了，好多，希望有耐心的师兄师姐和老师指教，大恩不言谢～ |
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