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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】跑胶杂带
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sunxiaoyu

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】跑胶杂带

跑胶为什么会有杂带，而且很亮
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1楼 2009-12-21 13:44:56
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hywang131

新虫 (初入文坛)
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0):退火温度吧？ 12-21 15:46
你跑的是琼脂糖胶么，有杂带说明你摸得温度不是最适温度，应该要升温的。
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2楼2009-12-21 13:50:45
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sunxiaoyu

铜虫 (初入文坛)
是琼脂糖胶，但一直都是用的这个温度呀
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3楼2009-12-21 15:14:11
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bioxixi

木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by sunxiaoyu at 2009-12-21 13:44:
跑胶为什么会有杂带，而且很亮

不懂，你可以写具体点儿
是指你做PCR有非特异性扩增吗？
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4楼2009-12-21 15:41:32
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xiaochongzii

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
请检查你的镁离子浓度，一般体系中镁离子的浓度过高会pcr出非特异性条带的。
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5楼2009-12-21 20:23:19
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200448506

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是质粒的话，有杂带有可能是正常的。构象不同
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6楼2009-12-23 09:05:43
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stelyo

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有没有换过不同牌子的Taq酶，不同厂家生产的，甚至不同批次的都可能有问题。有的酶就是容易有非特异性扩增。
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7楼2009-12-23 09:09:05
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chenjiong1119

银虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
Originally posted by hywang131 at 2009-12-21 13:50:
你跑的是琼脂糖胶么，有杂带说明你摸得温度不是最适温度，应该要升温的。

每次和每次的实验都不一样的！！要摸索温度和胶的浓度，缓冲液是否新鲜等都要考虑，质粒本来就应该有三条带的
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8楼2009-12-23 14:51:54
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dy_414

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最好把电泳的图发上来看看。。。
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我坚信，rp是攒出来的
9楼2009-12-25 15:54:54
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liudaihualyh

金虫 (小有名气)
是琼脂糖还是聚丙烯的
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10楼2009-12-25 21:35:09
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