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【求助/交流】酶催化反应的一些注意事项
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| 本人近期在测定caspase-3催化其底物Ac-DEVD-pNA的活性实验。原理是基于催化裂解后pNA游离出来测定其在405nm处的吸光值。实验中,本人在相同实验条件下做三个平行,多次重复这个催化过程,但有的时候反应两三天也只是裂解了底物总量的三分之一,有时候又在3、4个小时内裂解了百分之九十多(但这种情况只出现一回,再也没重复出现过,而且在三个平行中也是只有一个出现这种情况,有一个裂解了一半、还有一个基本没反应。)本人实在找不出什么原因会出来这种结果,不知道大家有没有遇到过这种情况。望哪位知道的大虾给小弟指点迷津,指出问题可能出现在哪。本人感激万分!!! |
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