24小时热门版块排行榜    

查看: 500  |  回复: 5
当前主题已经存档。

hhhwei2216

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于动物组织基因组提取的问题

本人要提高质量的鱼类组织的DNA,但是提出来的基因组的浓度不是很理想,而且还夹杂着核糖体RNA,如何避免RNA的产生,我后续需要包装DNA,所以对DNA的质量要求很高,浓度必须达到要求才能继续做,不知道各位有没有做过的,或者有没有专家帮忙分析一下,给予帮助。不胜感激
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
1949stone(金币+1,VIP+0):是的 12-20 20:26
hhhwei2216(金币+1,VIP+0): 12-26 19:37
避免RNA可能有点难,可以用RNase下。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-12-20 19:27:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):同意 12-20 20:26
hhhwei2216(金币+1,VIP+0):谢谢交流! 12-26 19:37
hhhwei2216(金币+1,VIP+0): 12-26 19:38
由于Tris酚抽核酸时,DNA和RNA都是在水相中一起被抽提出来的,所以只有通过加RNase来去除
3楼2009-12-20 20:25:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hhhwei2216

木虫 (正式写手)

我是用酚氯仿提取的,protocol里面说是可以得到高质量的。
4楼2009-12-20 21:36:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


hhhwei2216(金币+1,VIP+0):谢谢,你的建议我会考虑,有机会再交流 12-26 19:36
引用回帖:
Originally posted by hhhwei2216 at 2009/12/20, 21:36:
我是用酚氯仿提取的,protocol里面说是可以得到高质量的。

但事实上就是会混入RNA,无法避免的。常规条件下,RNA并不影响使用,且RNA容易降解。但要很纯的DNA,就一定得用RNase。许多高端的DNA纯化试剂盒,比如Invitrogen的PureLink系列,都是含有RNase试剂的
5楼2009-12-20 22:42:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


hhhwei2216(金币+1,VIP+0):建议不错,我正在尝试自己的方法,谢谢交流 12-26 19:36
RNA的问题如楼上几位所说即可解决。关于高质量的DNA如何获得,给点小建议,可以将消化所用裂解液中的EDTA浓度提高至500mM,楼主应该使用的是10mM-100mM范围的裂解液,这是常规的DNA提取方法,如果想获得高质量DNA就需要提高EDTA的浓度,但是,这样就会使得到的DNA中EDTA的浓度过高,而影响后续实验,需要使用透析的方法将EDTA和钠盐透析掉,去买点透析袋,透析就可以了。如果嫌这种方法麻烦,可以反复多抽提几次,但是获得的DNA浓度会降低,所以溶解的时候要用特别少量的水或者TE。
6楼2009-12-21 20:42:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hhhwei2216 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +12 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 12/600 2026-08-13 16:45 by 1Ec8kS2uMeS6
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +5 医学老男孩 2026-08-13 11/550 2026-08-13 15:41 by sdfapple719
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 6/300 2026-08-13 15:34 by 高飞的梦想
[基金申请] FileCode能看出啥? +8 要乐观耀哥 2026-08-10 26/1300 2026-08-13 12:01 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 11/550 2026-08-13 10:40 by ZH远山
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见