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raindrop8316

金虫 (正式写手)

有一个问题我始终不明白,你非要孢子萌发干什么?不能直接用菌丝吗?孢子萌发以后长出来的还是菌丝啊,为什么非要用孢子,再萌发成菌丝呢?
“这次将原始菌种活化,冲了孢子后涂板,还是不萌发。”
你这个活化是怎么活化的?应该是用菌丝吧?否则的话,你的孢子不萌发,拿什么来活化?
我们做的真菌,一般孢子是不需要离心就可以自动沉降下来的。不过被孢霉的情况我就不清楚了。
书到用时方恨少 钱到月底不够花
11楼2009-12-21 16:03:57
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安静的位置i

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by raindrop8316 at 2009-12-21 16:03:
有一个问题我始终不明白,你非要孢子萌发干什么?不能直接用菌丝吗?孢子萌发以后长出来的还是菌丝啊,为什么非要用孢子,再萌发成菌丝呢?
“这次将原始菌种活化,冲了孢子后涂板,还是不萌发。”
你这个活化是 ...

我们要做转化,菌丝是多核的,转化时容易产生不稳定的转化子,孢子是单核的,所以用孢子转化,稳定性就会好很多。
12楼2009-12-21 22:01:27
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安静的位置i

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 克隆大虾 at 2009-12-21 11:12:

培养基成分也具有重复性?
找个别的产孢真菌重复下你的流程,看一下.好运.

恩,好,我验证下培养基。
13楼2009-12-22 09:46:20
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安静的位置i

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2009-12-21 13:47:
1、没必要用“您”这个尊称,大家交流而已。
2、关于吐温
有几种不同的吐温,分子式和性质都不同的,不知道是不是吐温的因素。
促进孢子萌发的使用浓度也有人做过梯度,不知道你有没有做过。
促进孢子萌发的用 ...

我用的是吐温80,我没有做过梯度实验,这个浓度是采用文献报道的数据;
我的这个真菌之前有个老师做培养方面的研究,他的实验结果是在两周时孢子量达到最大,因为这个菌产孢能力一般,而我们又需要浓度高的孢子液。你们对于产孢时间的检测,就是选取不同培养天数的菌冲孢子,然后镜检或涂布,看什么时间最多吧?
我下次也尝试下稍微暴力得对待它,看能否奏效:)
14楼2009-12-22 09:57:42
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安静的位置i

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2009-12-21 13:47:
1、没必要用“您”这个尊称,大家交流而已。
2、关于吐温
有几种不同的吐温,分子式和性质都不同的,不知道是不是吐温的因素。
促进孢子萌发的使用浓度也有人做过梯度,不知道你有没有做过。
促进孢子萌发的用 ...

另你认为萌发不同步是由于板子上菌落太密集造成的,是吗?这很矛盾,因为我要做的是基因枪转化,需要孢子涂板的高密度,但是又希望萌发能够同步,不然利用抗性筛选时就很麻烦,菌落先后长出,不好判断哪个是阳性克隆了吧,不知这方面是否有经验?
15楼2009-12-22 10:01:37
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