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hugang2004_2000

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】sephadex LH20 分离原理

在网上查了很多关于sephadex LH 20的相关资料,其中中文资料中,说在反相溶剂(如甲醇/水)中的分离机理是反相吸附,而在正相溶剂(如氯仿/甲醇)中靠分子筛来分离。但是在英文资料中,从来没看到reverse phase 的字样,请问大家怎么看?大家有GE公司关于这个凝胶反相吸附的技术材料的话还望多指点。
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乙酰水杨酸

木虫 (正式写手)

KOP


hugang2004_2000(金币+1,VIP+0):谢谢! 12-18 18:54
反相的机理主要是LH20凝胶表面键和相的原因吧
浮世绘卷拓不懂濯清涟不妖
2楼2009-12-18 18:50:41
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狼狼晴空

木虫 (著名写手)


hugang2004_2000(金币+1,VIP+0): 12-18 18:54
不太精通,帮你顶
3楼2009-12-18 18:50:52
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hugang2004_2000

木虫 (正式写手)

这是两个版本的sephadex lh20产品说明书,里面的这两段话是描述分离机制的:
1:Unique chromatographic selectivity due to dual hydrophilic and lipophilic nature of the matrix: separates by gel filtration, adsorption chromatography and normal phase partition chromatogragraphy. 兼有亲水性和亲脂性本质,可以通过凝胶排阻,吸附色谱和正相分配进行分离。这里不但没有提反相,反而明确提出了正相。

2:Major separation mechanism (Details) 主要分离机制
===============================================
* according to size:大小
* separation by adsorption:吸附
* separation by straight-phase partition 纯相色谱

[ Last edited by hugang2004_2000 on 2009-12-18 at 19:09 ]
4楼2009-12-18 19:08:05
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hugang2004_2000

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 乙酰水杨酸 at 2009-12-18 18:50:
反相的机理主要是LH20凝胶表面键和相的原因吧

加了羟丙基,就能有反相分配作用了?羟基应该是主要起作用的吧?丙基应该是减小孔隙作用的吧?这样凝胶的孔隙才能足够小到可以用排阻的机理来分离分子量小于4000的分子吧?
5楼2009-12-18 19:13:26
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乙酰水杨酸

木虫 (正式写手)

KOP

★ ★ ★ ★ ★
hugang2004_2000(金币+3,VIP+0):多谢!明白多了。能否共享一下文献或者原始资料? 12-18 22:32
472514568(金币+2,VIP+0):谢谢回帖! 12-18 23:33
回楼上:LH-20主要是在G-25上引入羟丙基,羟丙基主要是增加亲脂性的,具有反相的作用而不是减少间隙的,因为羟丙基相对于交联葡聚糖分子还是太小了。其反相或分子筛的作用主要取决于你采用的洗脱溶剂。在用到低级醇或其与水的混合溶剂时候(这类溶剂在反相柱上洗脱能力是相对较弱的)所以此时凝胶有分子筛和反相的双重作用。当用到氯仿等极性相对于水,甲醇较低的有机溶剂时,凝胶反相的作用机制被抑制,则分子筛作用成为主要作用机制
浮世绘卷拓不懂濯清涟不妖
6楼2009-12-18 21:47:20
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steveplum

至尊木虫 (知名作家)


hugang2004_2000(金币+1,VIP+0):节日快乐!呵呵 12-26 13:59
学习,我目前也在用lh-20
正在摸索流动相的选择
——————————————我滴爱~赤裸裸~~
7楼2009-12-18 23:12:42
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