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moonway111

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】氯化锂 转化 毕赤酵母 相关问题

请问各位大侠,用氯化锂转化毕赤酵母的时候,所用的鲑鱼精DNA 有何作用?
线性化之后的DNA 还需要再纯化吗?如果不需要,线性化酶及缓冲液成分对转化效果是否有影响?
转化方法中还提到,溶解于50微升灭菌水中的质粒DNA(5~10微克),是指空载体DNA,还是鲑鱼精DNA? 为什么要这么做?

请各位高手赐教,非常感谢!
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能喝半斤喝八两,这样的干部要培养;能喝八两喝半斤,这样的干部不放心。
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tianpingpe

新虫 (小有名气)

线性化的DNA是要纯化的,主要是为了后面电击的时候减小盐离子对电击的时间和电压的影响。如果盐离子浓度高了,转化效率会降低。纯化后的DNA最好是用超纯水溶解。DNA量,一般是指你的载体加上你的目的片段吧,要求DNA量比较高才能保证转化率,转化出来的克隆才多。
2楼2009-12-18 14:37:40
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