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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】氯化锂 转化 毕赤酵母 相关问题
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moonway111

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】氯化锂 转化 毕赤酵母 相关问题

请问各位大侠，用氯化锂转化毕赤酵母的时候，所用的鲑鱼精DNA 有何作用？
线性化之后的DNA 还需要再纯化吗？如果不需要，线性化酶及缓冲液成分对转化效果是否有影响？
转化方法中还提到，溶解于50微升灭菌水中的质粒DNA（5~10微克），是指空载体DNA，还是鲑鱼精DNA? 为什么要这么做？

请各位高手赐教，非常感谢！
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能喝半斤喝八两，这样的干部要培养；能喝八两喝半斤，这样的干部不放心。
1楼 2009-12-18 13:55:02
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tianpingpe

新虫 (小有名气)
线性化的DNA是要纯化的，主要是为了后面电击的时候减小盐离子对电击的时间和电压的影响。如果盐离子浓度高了，转化效率会降低。纯化后的DNA最好是用超纯水溶解。DNA量，一般是指你的载体加上你的目的片段吧，要求DNA量比较高才能保证转化率，转化出来的克隆才多。
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2楼2009-12-18 14:37:40
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