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gydgs033

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教达人:PAGE电泳分离DNA时间

如题,有2个目的DNA,相差50bp,请问是否能用PAGE分开,大概电泳需多久,另外,是否可以用琼脂糖分呢?
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wulei0708

银虫 (小有名气)

可以加大琼脂糖的浓度
2楼2009-12-15 22:23:46
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wwyy0818

新虫 (小有名气)

加大胶浓度,可以分开
3楼2009-12-16 00:16:48
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won7

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
gydgs033(金币+1,VIP+0):非常感谢 12-16 19:35
amisking(金币+2,VIP+0): 12-17 08:37
50bp差异太小了,加大琼脂糖的浓度(2-2.5%)或许可以可见区别,但要分别回收是有困难的。用6-8%PAGE胶分开就明显了。至于电泳时间就看你的片段长度了,一般400-500bp的话,30V/cm 4-5小时就可以了。
4楼2009-12-16 11:00:11
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bioxixi

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
gydgs033(金币+1,VIP+0): 12-16 19:36
amisking(金币+2,VIP+0): 12-17 08:37
能 具体时间不知道,没有做过
用琼脂糖的话建议1.8-2%的浓度,电流小一些,分离30-40分钟应该能区分清楚
5楼2009-12-16 11:16:22
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apple-z

银虫 (小有名气)

不建议你用琼脂糖,要想回收到的话比较难
6楼2009-12-16 23:34:05
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liyong1981

金虫 (正式写手)


不建议琼脂糖胶,建议PAGE胶,电泳2小时左右,切胶,回收,
7楼2009-12-17 08:31:24
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