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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教达人：PAGE电泳分离DNA时间
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gydgs033

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教达人：PAGE电泳分离DNA时间

如题，有2个目的DNA，相差50bp,请问是否能用PAGE分开，大概电泳需多久，另外，是否可以用琼脂糖分呢？
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1楼 2009-12-15 21:53:50
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wulei0708

银虫 (小有名气)
可以加大琼脂糖的浓度
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2楼2009-12-15 22:23:46
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wwyy0818

新虫 (小有名气)
加大胶浓度，可以分开
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3楼2009-12-16 00:16:48
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won7

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
gydgs033(金币+1,VIP+0):非常感谢 12-16 19:35
amisking(金币+2,VIP+0): 12-17 08:37
50bp差异太小了，加大琼脂糖的浓度（2－2.5％）或许可以可见区别，但要分别回收是有困难的。用6－8％PAGE胶分开就明显了。至于电泳时间就看你的片段长度了，一般400－500bp的话，30V/cm 4－5小时就可以了。
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4楼2009-12-16 11:00:11
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bioxixi

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
gydgs033(金币+1,VIP+0): 12-16 19:36
amisking(金币+2,VIP+0): 12-17 08:37
能 具体时间不知道，没有做过
用琼脂糖的话建议1.8-2%的浓度，电流小一些，分离30-40分钟应该能区分清楚
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5楼2009-12-16 11:16:22
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apple-z

银虫 (小有名气)
不建议你用琼脂糖，要想回收到的话比较难
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6楼2009-12-16 23:34:05
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liyong1981

金虫 (正式写手)
不建议琼脂糖胶，建议PAGE胶，电泳2小时左右，切胶，回收，
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7楼2009-12-17 08:31:24
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