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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于细胞固定后分子是否可以扩散
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qingbo62

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于细胞固定后分子是否可以扩散

用荧光分子（如阿霉素）做药物或者基因在细胸内的定位已是很常做的实验。

用多聚甲醛固定细胞后，是否认为这些荧光分子是无法在细胞内运动（扩散）了？
如果这样的话，为什么还可以在固定细胞后通过荧光抗体或其他荧光分子等对细胞内的微结构（核、膜或其他细胞器）进行染色？难道抗体还可以在细胞内运动？
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1楼 2009-12-15 12:46:40
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qingbo62

木虫 (正式写手)
没有人会吗？
6金币相送。
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2楼2009-12-15 19:09:58
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ethan2801

木虫 (著名写手)
★
qingbo62(金币+1,VIP+0):thanks 12-31 15:15
不知道，友情帮顶一下
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3楼2009-12-15 19:10:32
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
qingbo62(金币+1,VIP+0): 12-15 20:52
抗体是固定后加的，当然不受影响了
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4楼2009-12-15 20:02:02
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qingbo62

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2009-12-15 20:02:
抗体是固定后加的，当然不受影响了

我的意思是固定以后，细胞内部应该无法自由扩散了，为什么抗体还能够自由运动了？
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5楼2009-12-15 20:52:12
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小神300

新虫 (初入文坛)
★
qingbo62(金币+1,VIP+0):thanks 12-31 15:14
固定，应该只是针对细胞本身吧，让细胞就处于固定时候的那个状态。当然固定的同时细胞膜通透性也增大，荧光染料或荧光抗体容易进入细胞，对核或其他细胞器进行染色是因为某些特异性结合吧，就像ELISA，抗体包被了之后不也是固定在酶标板上，你加入抗原它还是能特异性结合的
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6楼2009-12-15 21:33:46
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
qingbo62(金币+1,VIP+0):thanks 12-31 15:15
固定的意思是，是细胞的一切代谢活动停止，处于固定前的状态，如果不固定，会使细胞崩解
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2009-12-15 22:19:57
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steven_wong

银虫 (初入文坛)
★
qingbo62(金币+1,VIP+0):thanks 12-31 15:15
用多聚甲醛固定细胞，主要是针对细胞中的蛋白
标本中大多数神经激素、肽类物质,以及蛋白质为水溶性，在用于研究之前，常需固定, 即使其凝固以降低其水溶性。甲醛能与蛋白质的氨基反应，使蛋白质凝固，因此在医药上可做为检验时的组织固定剂、以及防腐剂等。在固定剂中，最常用的是多聚甲醛。
但这样处理会对细胞膜造成一定的伤害，提高通透性。而且也不会阻止小分子物质的自由扩散
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8楼2009-12-15 22:47:30
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zplipeng

金虫 (著名写手)
★
qingbo62(金币+1,VIP+0):thanks 12-31 15:16
难道加入抗体的时候，细胞还放在固定液里吗？？？？
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加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
9楼2009-12-16 14:01:26
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zplipeng at 2009-12-16 14:01:
难道加入抗体的时候，细胞还放在固定液里吗？？？？

那肯定不会啊，固定过就行了，然后要把固定液洗净的
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
10楼2010-01-01 12:18:15
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