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【求助/交流】大家在克隆表达进行测序验证时测一个方向还是两个?
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lihaoexe
银虫
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专业: 临床生物化学检验
[交流]
【求助/交流】大家在克隆表达进行测序验证时测一个方向还是两个?
如题,谢谢交流。
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1楼
2009-12-14 20:01:42
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冼亮淀粉酶
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生物大分子降解酶
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注册: 2009-09-25
性别: GG
专业: 环境微生物学
管辖:
微生物
两个方向都测通,这样才能确保测得的序列准确,才能看出来连接之后跟原序列相比有没有被突变掉个别碱基。
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流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼
2009-12-14 23:25:48
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apple-z
银虫
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专业: 疫苗学
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
一般双向测通比较保险
但是如果你的目的条带比较小,上游测序引物距离目的条带又足以保证满足测序不稳定或说是测序不准确的碱基个数的话,也可以只正向测序。
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3楼
2009-12-15 00:01:56
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lxj341401
至尊木虫
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在线: 712.4小时
虫号: 111074
注册: 2005-11-20
专业: 生物化学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
序列小的话测一个方向就行了,大肯定两向了
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4楼
2009-12-15 07:33:11
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kitty8682
金虫
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注册: 2008-09-22
专业: 能源化工
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
一个反应大概测得了六七百bp,片段再大的话只好测两个反应了
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5楼
2009-12-15 09:20:23
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yiyiglad
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虫号: 694197
一般片段在800内都是选择一个方向测通就行了,片段长了,要双向测,比较准确
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6楼
2009-12-15 19:56:25
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