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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】T克隆
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】T克隆

奇怪了，做的T克隆，挑菌落做PCR的时候没有条带就算了，跑的条带怎么一片模糊状，崩溃，做了这么多次的T克隆都没有出现这种情况，怎么会这样呢？谁知道。。。。唉
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1楼 2009-12-14 19:13:16
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能引物出问题了，也可能跳得不是单克隆所致。
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2楼2009-12-14 21:39:15
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Temin2009

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你看能不能挑几个克隆，提取质粒，做个酶切鉴定看看。
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3楼2009-12-14 22:38:46
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yiyiglad

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是缓冲液时间太长了，胶没有做好。或者是，模板浓度有问题。
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4楼2009-12-14 23:15:20
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spiderboy

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
挑些克隆，培养下，提点质粒，做酶切，，很简单的。。一般T载体都用BamHI酶切，切上半个小时就可以了。。。很快的
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5楼2009-12-15 00:07:12
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
恩，多谢上面各位虫友的建议，偶决定一一试过去看看哪里出了问题。。。。
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6楼2009-12-15 08:36:41
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