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雨后郁金香

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】T克隆

奇怪了,做的T克隆,挑菌落做PCR的时候没有条带就算了,跑的条带怎么一片模糊状,崩溃,做了这么多次的T克隆都没有出现这种情况,怎么会这样呢?谁知道。。。。唉
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能引物出问题了,也可能跳得不是单克隆所致。
2楼2009-12-14 21:39:15
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Temin2009

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你看能不能挑几个克隆,提取质粒,做个酶切鉴定看看。
3楼2009-12-14 22:38:46
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yiyiglad


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是缓冲液时间太长了,胶没有做好。或者是,模板浓度有问题。
4楼2009-12-14 23:15:20
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spiderboy

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
挑些克隆,培养下,提点质粒,做酶切,,很简单的。。一般T载体都用BamHI酶切,切上半个小时就可以了。。。很快的
5楼2009-12-15 00:07:12
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)

恩,多谢上面各位虫友的建议,偶决定一一试过去看看哪里出了问题。。。。
6楼2009-12-15 08:36:41
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