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liluweim77

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】MTT和SRB法的区别

在做药物对肿瘤细胞系的抑制率时,为什么有的细胞用MTT法,有的用SRB法,这主要取决于什么?谢谢~
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louyiceng

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主

★ ★ ★ ★
liluweim77(金币+4,VIP+0):谢谢,可是为什么不同的细胞系,会用不同的方法呢,比如HL-60用MTT,而KB用SRB呢? 12-15 10:52
MTT比色法:MTT比色实验是一种检测细胞存活和生长的方法。由于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原成难溶的蓝紫色甲臜并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。DMSO溶解甲臜后,用酶标仪在一定波长处测定其吸光度值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,甲臜的形成量与活细胞数成正比。该方法灵敏度高、重复性好、操作简便、经济快速。
磺基罗丹明B (SRB)法:SRB (Sulforhodamine B.)是一个粉红色的氨基甲氧杂蒽类化合物,含有2个磺基,它在酸性环境下,能与三氯乙酸固定后的细胞内大分子上的碱性氨基酸通过静电引力结合,被结合染料的多少在一定范围内线性地反映蛋白质的量,而蛋白质的多少与细胞的数目是成正比的,因此,可根据染色强度推测细胞数。
2楼2009-12-14 21:44:36
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fenweiking

新虫 (初入文坛)

目的比较CCK-8、MTT、SRB三种检测细胞增殖方法的相关性、重复性、稳定性和灵敏性,探讨使用三种方法进行抗肿瘤药物体外筛选的适应性。 方法将悬浮生长的人红细胞白血病细胞K562和贴壁生长的人肝癌细胞HepG2调整成1×10~3~1×10~6/ml之间的十个细胞浓度种于96孔板,分别用CCK-8、MTT和SRB法检测其光密度(OD)值,比较三种方法的相关性;三种方法分别重复三次,比较其重复性;于九个不同时间点测定其OD值,比较其稳定性;检测四个待测样品和两个已知抗肿瘤药对两株细胞的增殖抑制率,比较其灵敏性。
3楼2009-12-15 07:47:44
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liluweim77

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by louyiceng at 2009-12-14 21:44:
MTT比色法:MTT比色实验是一种检测细胞存活和生长的方法。由于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原成难溶的蓝紫色甲臜并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。DMSO溶解甲臜后,用酶标仪在一定波长处测定 ...

谢谢,可是为什么不同的细胞系,会用不同的方法呢,比如HL-60用MTT,而KB用SRB呢?
4楼2009-12-15 10:53:14
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