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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】用苯酚抽提蛋白总是不分相，大家帮忙分析下大概是什么原因？
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pptony113

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】用苯酚抽提蛋白总是不分相，大家帮忙分析下大概是什么原因？

蛋白提取液中有DTT ，urea，tween20，等
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1楼 2009-12-14 16:16:54
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lzh860801

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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1949stone(金币+3,VIP+0):谢谢交流 12-14 17:49
酚抽提 分层与体系关系较大
不知道你总体系是多少 体积的
如果你用4ML一下的体积来做看不出分层式很正常的
总体积大于6ml的话分层很明显
实际上我用2ML的EP管做的时候我也是看不到分层 一般就取上面300ul
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2楼2009-12-14 17:28:26
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
加点异戊醇有利于分相
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3楼2009-12-14 18:54:12
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
★
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饱和酚溶液最上面一层是水（或Tris），下面才是酚呢，你是不是吸得都是这里的啊？
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漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
4楼2009-12-15 11:35:26
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won7

金虫 (小有名气)
★
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pH会影响分成，如果裂解液的pH过高（>9）或过低(<6)，可能会导致苯酚与水互溶，不分层。
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5楼2009-12-15 13:42:48
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superyuanjia

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
估计是吸到水了，苯酚上层一般是水
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6楼2009-12-15 18:39:17
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pptony113

铜虫 (小有名气)
2ml的pe管 我减半了尿素含量 分相了 只是苯酚项很少 这样不知会影响提取结果不会  不分享总不会是试剂的问题吧？我用的所来宝进口分装？这试剂咋样啊 ？以前都用GE的
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7楼2009-12-21 22:57:18
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pptony113

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2009-12-14 18:54:
加点异戊醇有利于分相

开始也这样认为，测ph没问题，2ml的pe管 我减半了尿素含量 分相了 只是苯酚项很少 这样不知会影响提取结果不会  不分享总不会是试剂的问题吧？我用的所来宝进口分装？这试剂咋样啊 ？以前都用GE的
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8楼2009-12-21 23:00:01
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