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【求助/交流】甲醛变性胶跑不好
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我最近做northern 但是甲醛变性胶老跑不好 在TAE缓冲液里面跑的挺好的 但是在变性胶里面RNA的带就是灰蒙蒙的 也是两条带 就是很昏暗 照TAE里面跑出来的那样估测那么多的RNA应该是很亮的 后来我再缓冲液里面也加了goldview 效果也是一样 没有改观 我也没有管 就接着转膜过夜 烘箱80度固定2h 杂交是按照地高辛试剂盒进行的 现在5h了 没看到结果 我用的变性胶是mops 缓冲体系的 10*mops配置的时候是是高温灭菌的 不知道是不是这一步除了问题 尼龙膜说明书里面写的是过滤灭菌 请各位高人指点迷津 |
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liyong1981
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