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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助

各位帮帮我吧， 下面是我的基因组图片，做PCR总做不出来，以前优化过条件还出现蛮好结果，可现在按那个条件怎么都做不出来了，怎么回事？帮帮我吧，好急啊
非常感谢啊
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1楼 2009-12-12 21:35:38
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apple-z

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 12-14 20:01
不知你的基因组的来源是哪.
图片看来有些像我做的凋亡细胞基因组的DNA ladder电泳图
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2楼2009-12-12 22:47:49
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hlp0226

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 12-14 20:01
你的基因组降解的太厉害了，而且RNA也没有进行消化。如果你要PCR扩增大一些的片段或者基因的话，体系里面加入的模版量就算跟所谓“标准”量，也就是你摸索的那个量一样，但由于降解的那部分不能用，相对来说能用的就很少了
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3楼2009-12-13 09:42:38
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xingrl

木虫 (著名写手)
★
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各样品量也不是很一致，感觉样品存在降解的现象
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4楼2009-12-13 14:08:35
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by apple-z at 2009-12-12 22:47:
不知你的基因组的来源是哪.
图片看来有些像我做的凋亡细胞基因组的DNA ladder电泳图

谢谢，那我该怎么办？我的是植物组织的，大概7月提的，我做pcr有效果么？要不要重提？或者多加样能弥补么？好急啊，做不出来，非常感谢
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5楼2009-12-14 11:09:28
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 青青草hwj at 2009-12-12 21:35:
各位帮帮我吧， 下面是我的基因组图片，做PCR总做不出来，以前优化过条件还出现蛮好结果，可现在按那个条件怎么都做不出来了，怎么回事？帮帮我吧，好急啊
非常感谢啊

谢谢，来源植物组织的，总p不出来，好急，怎么回事？
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6楼2009-12-14 11:10:12
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tianpingpe

新虫 (小有名气)
★
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如果有材料还是重新提取DNA吧，降解的比较厉害。肯定会影响你的pcr效果。
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7楼2009-12-14 11:22:35
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 青青草hwj at 2009-12-14 11:10:



谢谢，来源植物组织的，总p不出来，好急，怎么回事？

降解了很影响pcr效果么？多加量可以么？谢谢
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8楼2009-12-14 19:22:32
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kraken

铜虫 (初入文坛)
★
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取新鲜的组织材料重新提吧，你的电泳图中基本是细胞凋亡之后的DNA，有可能你要的片段已经断开。
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9楼2009-12-19 11:14:27
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yiyiglad

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):鼓励。。 12-19 18:41
建议将模板测一下浓度，先看一下DNA的质量，260/280
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10楼2009-12-19 15:28:20
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