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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电泳问题
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate

[交流] 【求助/交流】电泳问题

大家提DNA之后会不会用电泳检验一下是否成功？那么电泳图是什么样子的呢？是不是有几个不同大小的条带及一些拖尾呢？这是什么原因造成的？是不是因为提取时对DNA造成的断裂引起的？还是因为DNA分别聚集在不同的染色体中呢？
另外，当我们对DNA进行PCR之后，再去电泳，我们肯定会看到指定条带发亮，那么那些未被扩增的条带是不显示还是亮度减弱？是不是因为被PCR体系稀释造成的呢？
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不忘初心，为梦远行。
1楼 2009-12-11 15:02:32
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+3,VIP+0):谢谢 12-11 16:50
1949stone(金币+1,VIP+0): 12-11 16:51
基因组DNA一般一条带，点样空不要发亮，泳道无拖尾，那是RNA和蛋白质造成的，有几条带说明，被你提取的时候打断了。
PCR的原理你可以找的到，在指数扩增期，那是几何数级增长的，因为引物的特异性，但是呢，其他的条带也是有的，所以，才要转化测序确定，或者点聚丙烯酰胺胶，它的分辨灵敏度很高，不是琼脂糖胶所能比拟的。希望对你有帮助~~~
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2楼2009-12-11 15:09:10
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tianpingpe

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0):有道理 12-11 16:51
提取DNA后一般都会电泳检查DNA提取是否成功，一般如果有marker的话，基因组DNA大概在23k的位置。一般是一条带，有的时候会有点拖尾。拖尾的话可能是因为提取过程中造成片段断裂，但是一般影响你后续的操作，如pcr，酶切等。如果是建库的话，DNA越完整约好。
未被扩增的是不显示，因为你模版本来就加的比较少，电泳的时候基本看不出来。
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3楼2009-12-11 15:10:13
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2009-12-11 15:09:
基因组DNA一般一条带，点样空不要发亮，泳道无拖尾，那是RNA和蛋白质造成的，有几条带说明，被你提取的时候打断了。
PCR的原理你可以找的到，在指数扩增期，那是几何数级增长的，因为引物的特异性，但是呢，其他 ...

好的，多谢了！
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不忘初心，为梦远行。
4楼2009-12-11 15:21:21
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate
引用回帖:
Originally posted by tianpingpe at 2009-12-11 15:10:
提取DNA后一般都会电泳检查DNA提取是否成功，一般如果有marker的话，基因组DNA大概在23k的位置。一般是一条带，有的时候会有点拖尾。拖尾的话可能是因为提取过程中造成片段断裂，但是一般影响你后续的操作，如pcr ...

好的，多谢了！
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不忘初心，为梦远行。
5楼2009-12-11 15:21:52
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
每个植物的基因组电泳后都只有一条带？我的有好几条，对PCR影响大么？
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6楼2009-12-11 16:20:40
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qiang84zhang

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
植物基因组那么大，肯定会断的！
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7楼2009-12-11 17:48:48
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate
引用回帖:
Originally posted by 青青草hwj at 2009-12-11 16:20:
每个植物的基因组电泳后都只有一条带？我的有好几条，对PCR影响大么？

我认为是不会的，因为基因组是巨大的，而断裂之后仅为几条带，没有那么巧正好断在扩增序列中间
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不忘初心，为梦远行。
8楼2009-12-12 18:12:42
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