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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate

[交流] 【求助/交流】电泳问题

大家提DNA之后会不会用电泳检验一下是否成功?那么电泳图是什么样子的呢?是不是有几个不同大小的条带及一些拖尾呢?这是什么原因造成的?是不是因为提取时对DNA造成的断裂引起的?还是因为DNA分别聚集在不同的染色体中呢?
另外,当我们对DNA进行PCR之后,再去电泳,我们肯定会看到指定条带发亮,那么那些未被扩增的条带是不显示还是亮度减弱?是不是因为被PCR体系稀释造成的呢?
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liyong1981

金虫 (正式写手)


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1949stone(金币+3,VIP+0):谢谢 12-11 16:50
1949stone(金币+1,VIP+0): 12-11 16:51
基因组DNA一般一条带,点样空不要发亮,泳道无拖尾,那是RNA和蛋白质造成的,有几条带说明,被你提取的时候打断了。
PCR的原理你可以找的到,在指数扩增期,那是几何数级增长的,因为引物的特异性,但是呢,其他的条带也是有的,所以,才要转化测序确定,或者点聚丙烯酰胺胶,它的分辨灵敏度很高,不是琼脂糖胶所能比拟的。希望对你有帮助~~~
2楼2009-12-11 15:09:10
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tianpingpe

新虫 (小有名气)

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1949stone(金币+2,VIP+0):有道理 12-11 16:51
提取DNA后一般都会电泳检查DNA提取是否成功,一般如果有marker的话,基因组DNA大概在23k的位置。一般是一条带,有的时候会有点拖尾。拖尾的话可能是因为提取过程中造成片段断裂,但是一般影响你后续的操作,如pcr,酶切等。如果是建库的话,DNA越完整约好。
未被扩增的是不显示,因为你模版本来就加的比较少,电泳的时候基本看不出来。
3楼2009-12-11 15:10:13
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2009-12-11 15:09:
基因组DNA一般一条带,点样空不要发亮,泳道无拖尾,那是RNA和蛋白质造成的,有几条带说明,被你提取的时候打断了。
PCR的原理你可以找的到,在指数扩增期,那是几何数级增长的,因为引物的特异性,但是呢,其他 ...

好的,多谢了!
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4楼2009-12-11 15:21:21
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate

引用回帖:
Originally posted by tianpingpe at 2009-12-11 15:10:
提取DNA后一般都会电泳检查DNA提取是否成功,一般如果有marker的话,基因组DNA大概在23k的位置。一般是一条带,有的时候会有点拖尾。拖尾的话可能是因为提取过程中造成片段断裂,但是一般影响你后续的操作,如pcr ...

好的,多谢了!
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5楼2009-12-11 15:21:52
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)


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每个植物的基因组电泳后都只有一条带?我的有好几条,对PCR影响大么?
6楼2009-12-11 16:20:40
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qiang84zhang

银虫 (正式写手)


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植物基因组那么大,肯定会断的!
7楼2009-12-11 17:48:48
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate

引用回帖:
Originally posted by 青青草hwj at 2009-12-11 16:20:
每个植物的基因组电泳后都只有一条带?我的有好几条,对PCR影响大么?

我认为是不会的,因为基因组是巨大的,而断裂之后仅为几条带,没有那么巧正好断在扩增序列中间
不忘初心,为梦远行。
8楼2009-12-12 18:12:42
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