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an2008

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】AFLP

求助,植物基因组的AFLP中的酶切,连接和pcr问题,我觉得只要酶切出来能看到些许弥散,pcr就应该能看出结果才对啊,请教各位大侠,我是酶切出问题了还是pcr出问题了呢?
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liyong1981

金虫 (正式写手)


问的太模糊,AFLP关键是体系很重要,你所在的实验室应该有自己的一套体系,照着做一般没有问题,分子标记嘛,就是纯体力劳动,做很多,一般就总会有结果的,量变到质变
2楼2009-12-11 15:12:48
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xyls6868

新虫 (小有名气)

AFLP


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
多谢指点,我的植物基因组用的是十月下旬的老叶子提取的,不知道是不是这个原因影响了我的实验结果,呵呵,但愿滴水能够穿石吧
3楼2009-12-14 10:59:56
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xyls6868

新虫 (小有名气)

试剂盒的问题


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
做AFLP有用过试剂盒的吗?价钱大约有多少,效果会怎么样呢?
4楼2009-12-15 10:47:55
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liyong1981

金虫 (正式写手)


试剂盒不如自己做省事,也没必要。除非你做的量少。但是分子标记要的就是大量重复性的劳动。故,试剂盒无性价比

鉴定完毕
5楼2009-12-15 13:07:48
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明月百合

木虫 (小有名气)

非常赞同5楼的说法!
6楼2009-12-17 00:43:58
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明月百合

木虫 (小有名气)

补充AFLP


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
就像5楼说的,试剂盒不如自己做省事,也没必要,并且,试剂盒中很重要的酶往往量不够用,比如T4连接酶和内切酶EcoR I,除非你做的量很少很少,且不需要摸索体系。
酶切出来能看到些许弥散,pcr就应该能看出结果,也不一定。接头制作和连接体系也很重要,连接时间一般影响不是很大。
7楼2009-12-25 23:25:48
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schkk

至尊木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的问题问的太不具体了,要是有个图看看也好啊
8楼2009-12-26 22:08:51
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