应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】做WB的虫友来帮忙分析下吧
31/1返回列表
查看: 170  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

kevin.wee

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】做WB的虫友来帮忙分析下吧

昨天做了ubiquitin的WB检测，内参选用的是actin，曝光后结果如图。第一张图(WB-1）是预实验的图片，第二张（WB-2)、第三张(WB-3)正式试验的图。
WB-1:1-5为liver，6-10是spleen
WB-2: 1  Vehicle-1；2 liver-24h-sample-1；3 Vehicle-2；4 liver-24h-samle-2；
      5  Vehicle-3；6  liver-24h-sample-3.........9 Vehicle-5；10 liver-24h-samle-5。
WB-3: 1  Vehicle-1；2 liver-48h-sample-1；3 Vehicle-2；4 liver-48h-samle-2；
      5  Vehicle-3；6  liver-48h-sample-3.........9 Vehicle-5；10 liver-48h-samle-5。
wb-2和wb-3 的Vehicle 相同
样本的经蛋白定量后统一稀释到5ug/ul，然后加了上样缓冲液后浓度为0.65*5=3.25ug/ul，上样15ul，预实验和正式试验各方面参数哦是一样的。从这三张图可以明显看出蛋白定量不够准确，而且差异比较大。
但最主要问题还是第二张图V-3样本的actin表达太突出，第三张也是（因为用的是同样的Vehicle，大概可以排除操作问题吧），对照定量结果发现V-3匀浆中蛋白含量是最低的，因此我又重新做了次定量，结果整体要比初次的高，但是V-3还是最低的，这就让我很困惑：
两次定量结果V-3的蛋白含量都是最低的，为什么检测却actin表达却是最多的，Actin在肝组织不同位置表达差异会很大吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-12-11 13:26:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kevin.wee

金虫 (小有名气)
这是第二张图
赞一下 回复此楼
2楼2009-12-11 13:27:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kevin.wee

金虫 (小有名气)
这是第三张图
赞一下 回复此楼
3楼2009-12-11 13:27:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kevin.wee 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭