Znn3bq.jpeg
查看: 1133  |  回复: 15
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liubang8355

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问细胞瓶中出现的密密麻麻的小黑点是什么东西啊,是怎么引起的啊?

请问细胞瓶中出现的密密麻麻的小黑点是什么东西啊,是怎么引起的啊?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaomi1208

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这是我查到的一点建议 我还没有试过  希望互相分享一下
处理黑胶虫的方法:
1.换好一点的血清(我觉着和血清的关系不大)。
2.如果是贴壁细胞的话,可用无菌的PBS洗几次,可一定程度上缓解。若是悬浮的话,就不太好处理拉,可以向其中少加一点滋养细胞(从小鼠腹腔内取的巨噬细胞,这种细胞不分裂,过一阵就死掉了,做抗体杂交瘤融合的同志肯定知道)。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效!还有就是实验环境要注意好,保持细胞间整个环境的洁净度。
3.换用进口的一次性塑料培养瓶。
4.建议清理无菌室所有物品,重新灭菌,用KMnO4熏蒸,按首次使用无菌室做,细胞重新复苏,。
5. 在换液前先加入生理盐水并轻轻拍打,冲洗干净后再加入培养液,坚持天天洗,传代时加生理盐水再离心一次,接种密度稍大一些,一段时间后,虫子就会大大减少,对细胞的生长也不会有大的影响。
6.有材料称minocycline具有一定的作用,可以和换液结合起来使用。
14楼2009-12-26 23:32:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


liubang8355(金币+1,VIP+0): 12-10 23:59
培养基是否浑浊?黑点是否增多?是否运动?是否连成一大片或者成团?
最好能上图,才方便分析
2楼2009-12-10 23:56:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liubang8355

金虫 (小有名气)

培养基没浑浊,黑点是增多了,也没连在一起,是分散的小点
3楼2009-12-10 23:59:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


liubang8355(金币+1,VIP+0): 12-13 19:23
推测是支原体,虽然支原体本身并不能通过低倍光镜直接观察到,但是支原体感染就会出现这种现象
同时,细胞状态会非常差,发亮,贴壁不牢,破碎等
发现这种情况立刻丢掉细胞,不要再养
重新复苏一支,然后视情况加入终浓度为1mg/L(1X)到10mg/L(10X)的四环素
如果刚复苏的没见到多大的黑点,可以加2X,慢慢传代看情况,逐渐减少用量,如果发现刚复苏已经很严重,那么要加10X来挽救,甚至用41度灭活12~18h的方法来挽救。
四环素配成1000X,避光-20度保存。放在培养基里面是现配现用

试试看吧,其实我最近也遇到这样的问题,加了四环素就好了
4楼2009-12-11 09:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见