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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【讨论交流】除蛋白质的方法
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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09yschen

金虫 (正式写手)

[交流] 【讨论交流】除蛋白质的方法

近来要除一些蛋白质，我想除了常用的乙腈和加热，还有什么方法好点，
用乙腈怕有干扰，有时很难除去多余的。用加热，会使样品中的水分损失。

请教……

[ Last edited by opq691 on 2009-12-12 at 23:46 ]
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1楼 2009-12-10 20:11:10
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houhl

金虫 (正式写手)

离心 电泳

★
opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流，欢迎常来分析版及专家版交流讨论 12-10 23:02
离心 电泳两种方法应该可以出去了
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2楼2009-12-10 21:15:31
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09yschen

金虫 (正式写手)
我的样品本来就少，加入有机物离心除蛋白质，怕离心后，在除去过量的有机液体时，无论是使用蒸发还是氮气吹，都会损失一部分水，这样会使待测物的浓度上升。
用蛋白质的盐效应怎么样？
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3楼2009-12-11 09:32:41
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+3,VIP+0):专家奖励！！^_^ 12-11 14:07
opq691(金币+1,VIP+0):我弱问一个，呵呵，加入氯仿-辛醇沉淀蛋白是直接沉淀还是需要离心静置？跟帖或者直接回复我 谢谢 12-11 19:37
除蛋白质的方法很多，但是要注意加入的试剂会不会对你的分析造成影响，列举如下：
1、加热
2、加入乙腈
3、加入三氟乙酸
4、加入氯仿-辛醇
5、半透膜
通过半透膜是最保险的，因为不引入其他物质，但是费时费力；用氯仿-辛醇能够快速使蛋白质变成沉淀，即使是一些小分子量的蛋白质也能用此方法除去。
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七窍通了六窍
4楼2009-12-11 10:44:33
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巫女子佩

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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happy169(金币+3,VIP+0):专家奖励！欢迎常来分析版 12-11 14:07
还可以超滤，但超滤价格高，滤膜有时候也对待测组分有吸附，需要仔细选择
或者是固相萃取，有专门除蛋白的柱子
这两种方法都比较贵，但是比沉淀法好用很多
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5楼2009-12-11 11:12:55
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kele9955

木虫 (著名写手)
★ ★
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opq691(金币+1,VIP+0):氯仿可以直接除去蛋白还是得离心？ 12-11 19:27
除蛋白的方法很多了，但是也得考虑你的样品是哪一类的，比如对于生物碱，用氯仿既可以除蛋白，同时又萃取到里面的样品，非常合适，你的是什么呢？
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昆嵛山的浪漫爱情传说，是今生你我的再次缠绵！
6楼2009-12-11 14:36:17
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kele9955

木虫 (著名写手)
★ ★
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opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 12-30 14:37
得离心，其他的不也得离心才能行？你说呢？
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昆嵛山的浪漫爱情传说，是今生你我的再次缠绵！
7楼2009-12-12 12:31:00
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jiang59430

银虫 (小有名气)
★ ★
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opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 12-30 14:38
现在好像渗透好像还很好啊，很多前处理都用这样方法的
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8楼2009-12-30 13:12:41
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edward12101759

金虫 (正式写手)
★ ★
opq691(金币+2,VIP+0):谢谢回帖交流 12-30 14:38
需要看是从什么分离蛋白质....
一般第一步可以盐析，沉降大部分蛋白质，
然后加热（如果对样品没有破坏的话），
离心（如果样品和蛋白没有结合的话），
超滤（样品的分子量和蛋白的分子量有差异），
甚至还可以过凝胶柱(如果想进一步纯化)。
办法很多，看被测物质的性质了。
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9楼2009-12-30 13:20:24
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liupps

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 09yschen at 2009-12-11 09:32:
我的样品本来就少，加入有机物离心除蛋白质，怕离心后，在除去过量的有机液体时，无论是使用蒸发还是氮气吹，都会损失一部分水，这样会使待测物的浓度上升。
用蛋白质的盐效应怎么样？

我注意到你强调自己的样品量少，考虑一下waters μElution提取板

μElution提取板专为少量体积的样品而设计，按照推荐方法，洗脱剂的体积可以低至25μL。低量的洗脱液可以直接进样，省去了耗时的挥发等步骤，缩短了样品制备的周期，增大了样品处理的能力。其中，Oasis HLB μElution提取板可用于寡聚核苷酸进行MS分析前的脱盐处理。


不是做广告。。。
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10楼2010-01-22 12:49:17
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