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ch2009121

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】Pcr产物浓度

Pcr 产物浓度偏低可能是什么原因导致的呢,在这里向大家请教一下  谢谢
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 12-9 11:45
原因可能很多
模板浓度过高或者过低,我每次用新模板做PCR都要先摸模板梯度,原液,10、100、1000倍稀释梯度。
退火温度过高,通过计算引物出来的温度实际上不一定合适。
PCR体系不合适,加点提高PCR效率的药剂进去,比如说离子液体。
药品失效,或者你忘记加东西或者加多加少了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2009-12-09 11:14:56
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
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1949stone(金币+2,VIP+0): 12-9 13:10
关键你PCR的产物是做什么用得!很多人问问题讲的不是很清楚,半截子话的问题,热心人很难回答。就像楼上所说,首先是你模板有没有问题等等,我补充一点,你跑出来的带是不是很锐利,不是的话,那引就要好好想想了,
3楼2009-12-09 12:00:05
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yzhang1986

铁杆木虫 (文坛精英)

优秀版主

★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 12-9 13:10
pcr就那么几个东西
一个个查一遍
4楼2009-12-09 13:02:06
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suiliucai

金虫 (小有名气)


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呵呵,既然有东西扩出来,证明体系应该不是太大的问题,你可以试试把循环数增加
5楼2009-12-09 13:49:25
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