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daweig2008铜虫 (小有名气)
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[交流]
【求助】急问化学发光重现性的问题 已有2人参与
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各位大侠： 本人刚刚开始做化学发光，仪器已经搭好，选择的体系是鲁米诺和双氧水。浓度分别为0.0005和0.25mol/L.为了验证体系的性能，我用戴安90泵定量进样25微升1PPM的铜离子。可是同样进样11次，几乎每次峰高都不一样，我还没有接色谱柱，是直接进样。载流是纯水。我看书上说化学发光应该重现性很好的，不知为什么我的实验是这样，很急。请各位大侠不吝赐教！ |
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daweig2008(金币+2): 兄弟真是好久才等来一个回复啊，呵呵，你最近还做发光吗 2011-04-08 13:08:01
liuzaiqing2004(金币+2): 说的很详细 2011-04-09 20:41:18
daweig2008(金币+2): 兄弟真是好久才等来一个回复啊，呵呵，你最近还做发光吗 2011-04-08 13:08:01
liuzaiqing2004(金币+2): 说的很详细 2011-04-09 20:41:18
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呵呵，好亲切的问题，来来来，师兄给你讲。 先看看你的基线稳不，检测方法是纯水， 纯水+luminol，纯水+双氧水，要是基线是四平八稳，那说明载流没问题。一般情况下纯水是不行的，要用二蒸去离子水，最好是缓冲溶液，我们都用PBS（0.1M或0.01M），推荐低浓度，虽然高浓度效果好，但是配置很费劲，不过效果很理想。 再来就是你的溶液配置问题，，一般情况下，除了贮备液，稀释的液体也最好使用缓冲溶液，鲁米诺用碱性配置，碱性对化学发光影响很大，一定要用缓冲溶液稀释，再就是别忘了一定要避光，双氧水也要避光，最好泡在冰水混合物中。 这个实验很气人，晚上效果比白天好的多...所以我们都是找个箱子扣住检测器部分。 再就是别纠结于几个数据，要看趋势，比如你做三个数值，发现是800 900 1000，觉得差的很大，但是你整体做下来，发先800 900 1000，2000 2100 2200， 4200 4000 4100，说不定就理想了呢。 发光这玩意儿本来就是很诡异，耐着性子慢慢做吧。  |
2楼2011-04-05 09:44:47
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3楼2011-04-08 13:37:23
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