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星海慧儿

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木虫精灵

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[交流] 【交流】HPLC出现倒峰的有关问题

最近用HPLC-RID作了一个样,老是在7分多钟的时候出现一个倒峰,流动相用的是乙腈-缓冲,走了纯乙腈、纯水、乙腈水的空白样,也都出现了这个倒峰,郁闷,不知道该怎样解释?难道是柱子的问题(我用的是C8柱)?
请教各位!
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我是超级天后:天天努力,不落人后!
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ynmyx

至尊木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 12-7 23:25
lcyhappy(金币+2,VIP+0): 12-11 15:26
倒峰的基本原理是这样的:以现有流动相校零时,样品中的杂质,包括样品本身得吸光度值低于流动相时,就会出现倒峰。实际反映得就是分离后,吸光度值的差异。高于流动相得就是正峰,低于流动相得就是负峰!
......别人笑我太疯癫,我笑他人看不穿;不见五陵豪杰墓,无花无酒锄作田!
2楼2009-12-07 14:59:11
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星海慧儿

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引用回帖:
Originally posted by ynmyx at 2009-12-7 14:59:
倒峰的基本原理是这样的:以现有流动相校零时,样品中的杂质,包括样品本身得吸光度值低于流动相时,就会出现倒峰。实际反映得就是分离后,吸光度值的差异。高于流动相得就是正峰,低于流动相得就是负峰!

可是我用的空白走了几针,同样都出现了倒峰,怎么回事啊
我是超级天后:天天努力,不落人后!
3楼2009-12-07 15:02:50
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pgzhou

金虫 (小有名气)

流动相有污染
4楼2009-12-07 15:16:49
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星海慧儿

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木虫精灵

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引用回帖:
Originally posted by pgzhou at 2009-12-7 15:16:
流动相有污染

不可能吧?
我用纯水、纯乙腈都走了,而且更换了几次流动相都是这样的
我是超级天后:天天努力,不落人后!
5楼2009-12-07 16:36:16
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ccbright1016

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
流通池脏了。
灯的能量低了。
6楼2009-12-07 18:45:18
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ynnbian

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
脱气不完全,是进气泡的原因。
淡泊,宁静。
7楼2009-12-08 10:09:54
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星海慧儿

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木虫精灵

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回复5、6楼
我做了很多张了,每张图都是这样的。
这是新仪器,流通池已经冲洗了一个多月,应该不会是脏了,而且基线很好啊。
灯的能量低了?那为什么每次都是七分多钟时候出现这个情况啊?怎么保证灯能量不低呢?

脱气应该是完全的:我事先用超声脱气然后仪器自己还带有脱气机,应该不会是脱气的问题;要是进气泡了,那位什么每次都进气泡,而且都是在七分钟出峰啊?
我是超级天后:天天努力,不落人后!
8楼2009-12-08 10:15:59
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cmj200412

金虫 (小有名气)


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有没有设定参比波长?有些软件是要设参比的,参比波长如果设定和检测波长差不多,也会出现倒峰
9楼2009-12-12 08:41:33
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babypc

金虫 (小有名气)

★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论! 12-15 19:40
你的吸收波长是多少
吸收波长过低的情况下是很容易出现负峰的
调整吸收波长试试
10楼2009-12-12 15:19:16
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