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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【交流】HPLC出现倒峰的有关问题
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星海慧儿

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木虫精灵

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[交流] 【交流】HPLC出现倒峰的有关问题

最近用HPLC-RID作了一个样，老是在7分多钟的时候出现一个倒峰，流动相用的是乙腈-缓冲，走了纯乙腈、纯水、乙腈水的空白样，也都出现了这个倒峰，郁闷，不知道该怎样解释？难道是柱子的问题（我用的是C8柱）？
请教各位！
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
1楼 2009-12-07 14:47:09
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ynmyx

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 12-7 23:25
lcyhappy(金币+2,VIP+0): 12-11 15:26
倒峰的基本原理是这样的：以现有流动相校零时，样品中的杂质，包括样品本身得吸光度值低于流动相时，就会出现倒峰。实际反映得就是分离后，吸光度值的差异。高于流动相得就是正峰，低于流动相得就是负峰！
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......别人笑我太疯癫，我笑他人看不穿；不见五陵豪杰墓，无花无酒锄作田！
2楼2009-12-07 14:59:11
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星海慧儿

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引用回帖:
Originally posted by ynmyx at 2009-12-7 14:59:
倒峰的基本原理是这样的：以现有流动相校零时，样品中的杂质，包括样品本身得吸光度值低于流动相时，就会出现倒峰。实际反映得就是分离后，吸光度值的差异。高于流动相得就是正峰，低于流动相得就是负峰！

可是我用的空白走了几针，同样都出现了倒峰，怎么回事啊
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
3楼2009-12-07 15:02:50
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pgzhou

金虫 (小有名气)
流动相有污染
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4楼2009-12-07 15:16:49
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星海慧儿

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引用回帖:
Originally posted by pgzhou at 2009-12-7 15:16:
流动相有污染

不可能吧？
我用纯水、纯乙腈都走了，而且更换了几次流动相都是这样的
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
5楼2009-12-07 16:36:16
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ccbright1016

金虫 (正式写手)
★
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流通池脏了。
灯的能量低了。
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6楼2009-12-07 18:45:18
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ynnbian

铁杆木虫 (小有名气)
★
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脱气不完全，是进气泡的原因。
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淡泊，宁静。
7楼2009-12-08 10:09:54
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

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回复5、6楼
我做了很多张了，每张图都是这样的。
这是新仪器，流通池已经冲洗了一个多月，应该不会是脏了，而且基线很好啊。
灯的能量低了？那为什么每次都是七分多钟时候出现这个情况啊？怎么保证灯能量不低呢？

脱气应该是完全的：我事先用超声脱气然后仪器自己还带有脱气机，应该不会是脱气的问题；要是进气泡了，那位什么每次都进气泡，而且都是在七分钟出峰啊？
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
8楼2009-12-08 10:15:59
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cmj200412

金虫 (小有名气)
★
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有没有设定参比波长？有些软件是要设参比的，参比波长如果设定和检测波长差不多，也会出现倒峰
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9楼2009-12-12 08:41:33
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babypc

金虫 (小有名气)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢参与讨论！ 12-15 19:40
你的吸收波长是多少
吸收波长过低的情况下是很容易出现负峰的
调整吸收波长试试
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10楼2009-12-12 15:19:16
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