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yindongxue

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】拟南芥种植中的封口膜问题

我打算采用以下方法种植拟南芥,但不知道这里所用的封口膜什么时候可以拆开,还是一直不用拆开?
首先,所有的器皿都要在超净台中用紫外灭菌,用酒精擦拭超净台。用MS培养基。
1.用1ml70%酒精在EP管中上下颠倒囍5分钟。
2.0.1%的HgCl2处理3分钟,大概要60微升。
3.用双蒸水洗3-6次,每次用水1ml
4.待种子下沉,用滤纸吸干水分。
划线,在培养基上呈现出大概1平方厘米的方格,以便以种植。
5.用10微升的小墙头点平板,点在方格的中心或相交线上,一定要在超净台中吹干,以防污染。
6.用封口膜封好,用报纸包好,在4度放置2-3天春化,利于萌发,然后再放在人工气候箱中培养。
大概10天左右就可以移栽了(要是情况而定)

[ Last edited by amisking on 2009-12-16 at 17:45 ]
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

★ ★ ★ ★
yindongxue(金币+4,VIP+0):很好 12-7 12:13
一直都不要拆开,没有关系的啊
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2009-12-07 09:15:09
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zhang6871

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 12-16 17:44
有点麻烦吧,没有你说的那么繁琐。
次氯酸钠消毒后无菌水洗3次,然后直接点到0.5MS培养基上(无糖),然后长个5天左右(22度,连续光照),移栽就可以了。不用封口膜,只要不乱动培养皿就不会染菌的。
过于功利,浮躁,布满灰尘的心都是创新的杀手!多记,心静,多动手,贴近大自然!
3楼2009-12-07 12:18:23
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aga0110125

银虫 (小有名气)


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不要用高分子膜,透气性不好
4楼2009-12-08 09:15:25
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杨大妞

新虫 (小有名气)


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封口膜用了,还是比较好的,保湿性比较强
5楼2009-12-16 15:01:33
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zjwang

木虫 (正式写手)

移栽的时候再拆。
6楼2009-12-16 16:18:42
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ericolivia

铜虫 (小有名气)

我是这么消毒拟南芥种子的。。。

★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 12-16 17:44
1、无菌水浸泡,1分钟后用移液枪吸出无菌水;
2、75%酒精浸泡30秒,因为听说酒精作用时间长了会影响萌发,用移液枪吸出酒精;
3、用无菌水洗一次;
4、25%次氯酸钠消毒5分钟,用移液枪吸出;
5、用无菌水洗5次。
tt
7楼2009-12-16 17:39:43
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tanfeng198

铜虫 (小有名气)


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可不可以先在四度处理三四天在消毒??
8楼2010-02-27 23:21:25
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