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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小药店

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】Sephadex LH-20的上样和洗脱

我想问一下,我的样品是黄酮苷类,溶解性非常不好,纯化到一定程度后用Sephadex LH-20纯化,可以固体上样吗?洗脱剂如何比例如何确定,可以跟硅胶柱似的用TLC确定吗?
本人没做过凝胶柱的,望大家多指教
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刘蓓蓓

金虫 (正式写手)

顶,我也想知道!!
2楼2009-12-06 20:03:12
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linzhaom

铁杆木虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 12-6 22:38
不用TLC确定,不能固体上样,只能用洗脱剂溶解后上样,否则不能用凝胶处理
修合无人见,存心有天知
3楼2009-12-06 22:27:42
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zhangmin5081

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 12-6 22:38
不能固体上样,凝胶柱可用作正向柱,如硅胶一样,用氯仿-甲醇1:1溶解后用同样的流动相洗脱,也可以只用甲醇溶解后用甲醇洗脱,也可以当做反向柱使用,ODS柱那样使用,用甲醇水洗脱
黄酮类用甲醇洗脱效果就不错
4楼2009-12-06 22:36:04
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yuanchunma

金虫 (正式写手)

可用甲醇水溶解,然后用不同溶度的甲醇进行洗脱,对于用TLC确定没有必要,就用30%,50%70%90%不同的甲醇浓度进行洗脱就可以啦!
moonlightshadow
5楼2009-12-06 23:02:34
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seageat

金虫 (正式写手)

★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 12-7 00:36
小药店(金币+1,VIP+0): 12-7 11:17
注意用词的准确性:固体上样没有这种提法!要专业呀,专业!

凝胶有溶胀问题,所以不能想着拌样后干法上柱。
6楼2009-12-06 23:55:40
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lazierboy

专家顾问 (正式写手)


小药店(金币+1,VIP+0): 12-11 17:14
可以用DMSO助溶,在上样
7楼2009-12-07 00:46:01
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匿名

用户注销 (文坛精英)



karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 12-8 00:05
本帖仅楼主可见
8楼2009-12-07 06:22:46
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liuqing472

铜虫 (初入文坛)

是不能固体上样儿,但是用TLC跟踪检测应该可以的.我们国SephdexLH-20就是用TLC监测的.
9楼2009-12-11 11:41:10
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