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curtlee

金虫 (小有名气)

[交流] 【交流】HPLC的一个问题

弱弱地问下,为什么在215nm的时候,用甲醇和水的混合流动相基线上下波动这么厉害啊?希望高手能够仔细解释下,谢谢
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qingbo62

木虫 (正式写手)

★ ★
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472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖! 12-4 16:28
一、基线波动厉害是多厉害?注射样品后是不是也这样?
       因为像HPLC基线的波动在小范围看上去似乎很大,但是一旦注射样品后,由于基线的波动远小于样品,基线就变平了。
二、HPLC基线不稳的原因:
1、流动相不干净(连续波动);
2、蠕动泵有问题、脏或者堵,柱压不稳(间断波动);
3、仪器工作环境不稳定,台面有扰动等等。
4、UV检测器问题等等

把具体情况拿出来分析

[ Last edited by qingbo62 on 2009-12-4 at 15:57 ]
2楼2009-12-04 15:49:27
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curtlee

金虫 (小有名气)

是满大的,肯定不是你说的这几个原因,因为波长在254的好好的。到215波动达到了峰高1左右,本身杂质就差不多这么高。进样前后都是这样。应该和流动相末端吸收有点关系,但是不是特别明白原因
3楼2009-12-04 16:33:13
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agilent9130


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换一台仪器了?可能是仪器管路冲洗不干净
水是否为纯化水?
4楼2009-12-04 16:38:39
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070918

木虫 (著名写手)


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甲醇本身在200nm左右就有吸收
天道酬勤
5楼2009-12-04 19:32:25
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muchong_xu

金虫 (小有名气)


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是啊,低波长的时候基线就是容易不稳定,流动相脱气一定要彻底,否则加重
6楼2009-12-04 20:51:24
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doraemon3280

金虫 (正式写手)


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末端吸收是容易基线不稳
白羊座的天空
7楼2009-12-04 21:02:43
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shaodongfang

金虫 (初入文坛)


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在低波长下,建议使用乙腈。甲醇有末端吸收嘛。
8楼2009-12-04 21:05:06
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haitianyise25

金虫 (小有名气)


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甲醇在低段具有吸收作用,影响流动相的均一性,不是太好。
9楼2009-12-04 21:14:41
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xiaoyuyiyi

新虫 (小有名气)


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明显的末端吸收,基线肯定跑不平!
10楼2009-12-04 21:24:29
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