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狼狼晴空

木虫 (著名写手)

[交流] 宝贵的细胞不小心消化过度?

辛辛苦苦从哈尔滨拿回来的细胞,回来时状态挺好。
第一次传代时,很难消化。于是第二次传代时加多了胰酶,结果不小心消化过头了。第二天,分瓶后原瓶细胞都聚在一起,而且是被消化后的圆形,看起来都是在瓶底的。不过用hanks液冲洗后,所剩细胞很少了,,也都是圆形的。但奇怪的是,新的那瓶一切正常。
从网上搜索到可以再吹散,加大血清浓度刺激下看看。
我的细胞还能挽救么?该怎么做?

本帖关键词:消化 过度 细胞 传代 挽救

[ Last edited by 狼狼晴空 on 2009-12-2 at 18:33 ]
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hyde0706

木虫 (正式写手)


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建议将培养基离心,收集细胞,加新鲜的培养基,血清可以适量增加一些,多观察,几个小时观察一次,悬浮细胞应该还是有能贴壁的。离心最好低温,800rpm就行了。
2楼2009-12-02 19:11:06
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狼狼晴空

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by hyde0706 at 2009-12-2 19:11:
建议将培养基离心,收集细胞,加新鲜的培养基,血清可以适量增加一些,多观察,几个小时观察一次,悬浮细胞应该还是有能贴壁的。离心最好低温,800rpm就行了。

明天第三天了,,还能挽救回来么?另外,贴壁的细胞经常观察,会不会影响它贴壁的过程呢?谢谢
3楼2009-12-02 19:38:14
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zy020202

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
两天啦,还都没有贴壁吗?这样情况不太好啊,你得好好调整下,要经常观察啦,再不贴壁就只好把没贴上的洗掉,靠剩下的传代了,时间久了,培养基不干净,也会影响状态好的细胞啊!
4楼2009-12-02 21:34:26
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hyde0706

木虫 (正式写手)


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同意楼上的,把悬浮细胞洗掉也是必要的。多观察不会有影响的吧,动作快一些,对培养条件影响不大的。
5楼2009-12-02 21:36:36
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