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内参的选择
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最近做动物肝脏细胞色素P450的Western blotting,用微粒体蛋白上样电泳。准备对其中的亚型进行定量,请问用什么内参好?GAPDH 还是beta-actin 或其他的?上述内参在细胞中的分布情况怎么样? P450主要分布在内质网上,在制取微粒体蛋白过程中(肝组织先细胞破碎后 离心去沉淀,再将上清超速离心后取下层)内参蛋白是否会因上述方法而损失?会不会在离心后的上清中作为废液而被舍弃了? [ Last edited by amisking on 2009-11-25 at 22:21 ] |
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