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mandy992

新虫 (初入文坛)

[交流] 测序出现了诡异。。。

peasy-t1克隆测序后,在插入位点ccctt之后可以找到引物的反向序列,可是找不到正向的反向互补。奇怪了。。。难道是断掉了插入的?

[ Last edited by amisking on 2009-11-24 at 17:46 ]
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changes

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 11-24 17:46
可能是单引物扩增的结果。然后连接到载体上了。不知你的PCR产物浓度高不高,单引物PCR产物一般浓度较低,带在琼脂糖上检测较弱。
2楼2009-11-24 09:36:15
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mandy992

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by changes at 2009-11-24 09:36:
可能是单引物扩增的结果。然后连接到载体上了。不知你的PCR产物浓度高不高,单引物PCR产物一般浓度较低,带在琼脂糖上检测较弱。

恩,是的哎。居然找到了两段反向的引物。。。可是是啥造成的捏
3楼2009-11-24 11:17:12
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changes

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
重新设计引物试试吧。换个位点。
4楼2009-11-24 11:28:15
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09021122

木虫 (正式写手)

基本同意二楼的观点  因为如果是单引物扩增出来的话  很可能找不到反向序列
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
5楼2009-11-24 17:43:24
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安宁

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能其中的一条引物有错配
6楼2009-11-24 18:33:25
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