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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 离子交换纯化蛋白的问题
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狼狼晴空

木虫 (著名写手)

[交流] 离子交换纯化蛋白的问题

我用离子交换树脂纯化的蛋白，最大的峰在最后一个峰，以前的梯度是0.1M和0.5M氯化钠。最大峰出现在0.5M里。
而一段时间以后怎么变成第一个峰最大了，这个峰出现在0.1M氯化钠洗脱液中！？郁闷啊请指教
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1楼 2009-11-23 09:15:43
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
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引用回帖:
Originally posted by 狼狼晴空 at 2009-11-23 09:15:
我用离子交换树脂纯化的蛋白，最大的峰在最后一个峰，以前的梯度是0.1M和0.5M氯化钠。最大峰出现在0.5M里。
而一段时间以后怎么变成第一个峰最大了，这个峰出现在0.1M氯化钠洗脱液中！？郁闷啊请指教

很可能的原因：你的挂柱缓冲液或洗脱液pH跟原来的不一样了！
你若存有原来的缓冲液，可以测一下其pH，估计相差起码0.5个了。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-11-24 at 07:57 ]
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
7楼2009-11-24 07:44:12
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重扶残醉

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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1949stone(金币+3,VIP+0):谢谢交流 11-23 11:58
纯化这玩意怎么说它好呢。楼主重复了几次试验呢，希望多重复几次，如果后面重复结果都是一样的，那么可能你的柱子要再生了。再说做纯化哪有关心峰大小的，只有关心是否为目的峰的。
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2楼2009-11-23 11:19:27
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狼狼晴空

木虫 (著名写手)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by 重扶残醉 at 2009-11-23 11:19:
纯化这玩意怎么说它好呢。楼主重复了几次试验呢，希望多重复几次，如果后面重复结果都是一样的，那么可能你的柱子要再生了。再说做纯化哪有关心峰大小的，只有关心是否为目的峰的。

做了好几遍了！
前面的和后面的不一样
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3楼2009-11-23 13:49:41
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crisis_2000

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 11-23 19:29
这就是纯化难的地方，我们希望每次的操作能够重复，所以工艺要可能的粗放，每次的实验条件影响因素要充分考虑到。
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5楼2009-11-23 16:16:13
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