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到底哪些实验需要低血清/血清饥饿处理？
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血清饥饿用在哪 上一篇我们已经聊过，血清饥饿不是单纯的"饿细胞"，而是在排除血清里复杂的外源刺激信号。那血清饥饿究竟在什么样的实验中需要用到呢？到底哪些实验需要低血清或无血清处理？ 其实啊，血清饥饿不是所有细胞实验都需要用到的，它适不适合做，关键看你想解决什么问题。 第一类：信号通路刺激实验 这是最常见的一类，比如你要看：IL-6刺激后p-STAT是否激活、TGF-β刺激后p-SMAD是否上来。 这类实验最怕的就是你还没上刺激条件，细胞已经被血清里的生长因子提前预热了。低血清处理在这的作用，就是先把培养环境中的背景扰乱因子尽可能降低，再看后面加进去的刺激到底有没有真正引起信号变化。 不过要注意啊，不是饿得越久越好，血清饥饿本身会引起细胞类型和时间依赖性的复杂反应，不是一个完全中性的操作步骤。 第二类：细胞周期同步实验 有些实验想看细胞从相对静止状态重新进入增殖，这时候就可以考虑低血清处理了。因为很多细胞在低血清或无血清条件下，会降低增殖活性，导致停留在G0/G1附近。Chen等人的研究就用血清饥饿诱导细胞周期同步，随后回补血清，让细胞重新进入细胞周期。 所以如果你的实验是看：G0/G1富集、细胞周期再进入、细胞周期相关基因变化，那可以考虑低血清处理。不过它不是完美的细胞同步器，它只是让细胞状态尽可能更统一，而不是绝对统一。 第三类：划痕实验和迁移实验 划痕实验里有时也会用低血清。原因很简单：划痕实验想看的是细胞迁移，但细胞会增殖。如果划痕区域变小了，到底是细胞爬过去了，还是细胞增殖把空白区域填上了？那这可就不好说了哟。 所以在划痕实验里，血清饥饿常用来减少增殖干扰，这是一个降低细胞增殖对划痕实验影响的常见非药物方式，但饥饿程度要根据细胞类型调整。 第四类：部分转染或感染实验 这个可要谨慎一点，不是所有转染前都要低血清。有些体系里，短期低血清会改变细胞状态，从而影响转染或病毒感染效率。但转染效率受细胞的密度、状态、培养基条件、血清等多种因素影响，所以可能血清饥饿更像一个优化条件，不是一个机械程序。 如果要转染难转染的细胞，或者想优化病毒感染效率，那可以考虑一下血清饥饿。但不要所有转染前都血清饥饿了！ 第五类：自噬、营养应激、凋亡相关实验 这个和前面有点不一样，在这类实验里，低血清本身可能就是一个处理条件。也就是说，你要研究的是血清饥饿后会发生什么。这种情况下，低血清或无血清本身就会影响代谢、增殖、自噬和细胞死亡。 如果你的实验本来就研究：代谢、凋亡、自噬、线粒体功能、氧化应激、细胞增殖，那就得考虑一下再决定是否使用低血清体系了。因为这不单单是降低背景影响，而可能是提前给细胞上了应激处理。 另外，原代细胞、干细胞等珍贵细胞，也不要直接照搬别人的条件，别人家的细胞能扛，不代表你家的也能扛。 总结 这个实验要不要血清饥饿要由你的实验目的决定，而非你想当然决定。如果不确定，那就查查文献看看怎么做。毕竟血清饥饿不是一个简单的处理手段，它本身就是个改变细胞状态的实验变量。 毕合生物提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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