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溪儿维娅

铜虫 (小有名气)

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[交流] 关于荧光染色固定液的做法

各位大侠，我最近要做荧光显微镜观察细胞的染色体。以前我做的时候都是活体染色，现在需要将细胞固定后再染色。但是具体这个细胞该怎样固定，用什么试剂固定？有没有哪位大侠做过，有没有具体的操作流程啊？
谢谢啦^_^

[ Last edited by amisking on 2009-11-21 at 16:36 ]

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1楼 2009-11-21 00:42:25

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~明晓溪~

木虫 (正式写手)

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专业: 植物学研究的新技术、新方

★
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取对数生长细胞，用0.25％胰蛋白酶消化，制成单细胞悬液。将细胞接种到预先放置几张6×22mm盖玻片的培养瓶或培养皿中，置二氧化碳培养箱培养1-3天，待细胞接近长成单层，取出盖玻片，进入PBS（0.01 mol/L,pH7.4）洗2次，然后根据实验目的，选择适当固定剂固定细胞。常用固定剂有：95％乙醇（固定时间10-30min），丙酮（5－10min）等。