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科研战神来了新虫 (小有名气)
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HE染色怎么看？教你病理入门读片五步法
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在动物实验与科研课题当中，病理切片观察是一项基础又十分关键的技能。不少新手拿到病理切片时常会无从下手，不清楚低倍镜、高倍镜各自的观察重点，难以分辨正常组织与病变区域，最终写出的病理分析报告逻辑混乱，需要反复返工。结合大量切片阅片经验总结出的五步读片法，帮助实验人员快速上手病理切片判读。 第一步，低倍镜观察，把握组织整体面貌 正式阅片应当优先选用4倍或者10倍物镜，先扫描整张切片，把控全局。这个阶段重点观察组织标本是否完整，有无大面积坏死区域，组织固有结构是否紊乱，同时确定病变区域的大致范围。正常器官都具备特征性的固有结构，例如肝脏拥有规整的肝小叶结构、肾脏具备肾小球结构；一旦发生病变，原本有序的组织排布就会遭到破坏。初学者很容易犯的错误就是直接切换至高倍物镜观察，只盯着局部细胞，忽略组织整体的病变分布，陷入“只见树木，不见森林”的误区，造成误判。 第二步，切换高倍镜，细致观察细胞形态 完成低倍镜的全局浏览之后，再换用20倍或者40倍高倍物镜，聚焦到目标区域分析细胞特征。观察指标包含细胞大小是否均一、细胞核形态、核浆比例、核分裂象多少以及细胞排列方式。正常组织内部的细胞大小均一，排布整齐有序；而发生肿瘤性改变的细胞往往大小悬殊，细胞核大且染色深，细胞排列杂乱无章，这些异型性特征是细胞病变的重要线索。 第三步，逐项对比，区分正常组织与异常组织 正常组织拥有规整的组织结构，细胞形态统一，没有大量炎症细胞浸润，不存在坏死区域。与之相对，异常组织会出现组织结构破坏、细胞异型改变，伴随淋巴细胞、中性粒细胞为主的炎细胞浸润；还可观察到坏死、增生以及肿瘤等各类病变。坏死区域表现为细胞结构消失，呈无结构红染区域；增生病变以细胞数量增多为主要特点；肿瘤病变则同时具备明显细胞异型性与浸润性生长两大特征。 第四步，熟悉特征，快速识别各类常见病变 科研切片中高频出现的病变有固定的形态特点，需要不断积累做到快速识别。炎症切片能够见到大量炎症细胞浸润，伴随组织水肿；坏死区域细胞核溶解消失，红染无结构；增生样本细胞数目增加，但是细胞形态依旧保持正常；肿瘤切片细胞异型突出，核大深染，核分裂象丰富，呈浸润生长；纤维化样本经Masson染色后可以见到大量蓝染的胶原纤维。熟练掌握各类病变典型形态，能够极大提升阅片效率。 第五步，整合全部信息，做出综合性判断 病理切片不能脱离实验背景单独解读，需要整合多方资料综合分析。结合实验分组、造模或者药物干预方式、取材部位，联动WB、qPCR、ELISA等分子实验结果进行互相印证，保证组织层面的病理改变和分子层面的功能变化相互对应，不能仅仅依靠一张切片就草率下定结论。遇到难以判定的样本，可以邀请病理专业医生会诊，避免主观臆断。 总而言之，病理读片遵循“先低倍看整体，再高倍看细胞，区分正常异常，识别病变类型，结合背景综合判读”的逻辑。病理阅片属于实践性很强的技能，只有大量阅片、反复练习，才能够不断提升切片判读的熟练度与准确度。 |
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