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样本采集注意事项及不同部位血液样本采集对比分析
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样本采集是许多动物实验操作中必需的步骤，这些步骤的实施并没有固定不变的规则，只有一般原则。根据实验要求操作是样本采集的大前提，在此前提之下，各类样本要遵循的一般原则如下: 1. 在采集无污染样本时 ① 手术器械常规消毒。 ② 采集非体表标本时，注意剥皮，避免皮肤给样本带来污染。无须仿临床样本采集操作，无须备皮和体表消毒。 ③ 在确定样本采集顺序时，注意取胃肠样本，避免消化道食物对样本的污染。 2. 在采集生物活性样本时 ① 实验动物处死后，心脏功能能维持一段时间，应在此期间迅速采集样本。 ② 样本采集后应迅速进行下一步处理，如冷冻、固定等。 3. 在采集病理样本时 ① 石蜡包埋标本要求形态完好。 a. 血管采集前，用肝素生理盐水冲洗循环系统，可避免血栓堵塞血管。 b. 血管内灌注福尔马林等固定液时，要保持生理血管内压，以保证血管正常形态。组织固定容器要选择大的，避免组织相互挤压，固定液的量要求是组织体积的5倍以上。 c. 取出肺后，要马上排除肺内气体，彻底置换肺内液体。 ② 冰冻样本要求快速处理，严格控制冷冻温度。 4. 在采集血液样本时 ① 选择合适的采血方式（小量单次/多次采血 大量采血）。 ② 选择合适的采血管（不同的实验选择不同的抗凝剂/促凝剂）。 ③ 样品的保存和测试时间点（如血常规需要现取现测/血气/血脂/......）。 常见动物采血方法的优缺点 1. 穿过皮肤刺破血管采血的方法虽简单快速，但是不能确保采集动脉血或静脉血，而且刺破皮肤后，血液流出易被皮肤、体毛等污染，成为不干净的血样。这种方法的采血部位包括大多数面部血管、隐动静脉、尾中动静脉、尾侧动静脉等处。 2. 令血液外流的采血方法，技术要求低，采血量大，但是无法保证血样的洁净。如摘眼球采血。 3. 针吸采血，可以保证血样洁净，但是技术要求高。如在心脏、后腔静脉、腹主动脉、颈外静脉、颈总动脉等处的采血。 4. 血管内置导管的方法，虽然操作烦琐，但血样的质量可以得到保证。尤其是需要在多个时间点采血时，其血样损伤极小。例如，代谢笼内电脑控制的颈外静脉置管采血。 5. 切断组织器官采血，例如，断尾、断颈等，方法最为简单，但血样成分最为复杂，其中包括动脉血和静脉血，还掺杂了淋巴液或其他可能的体液。 小鼠采血原则 1. 表浅血管穿刺采血，只限于非纯净血样。 2. 心脏和大动脉采血用于终末实验。 3. 非终末实验，尽量减小采血造成的机体损伤。 4. 多次采血，小鼠需要身体恢复时间。有些血管可行两侧轮换采血，限制每次采血量，最大安全采血量0.2 (ml)最小致死采血量0.3 (ml)。 5. 残酷采血必须深麻醉，例如断颈、摘眼球。这些残酷方法除了操作简单、采血量大以外，没有其他特殊长处，不推荐采用。 6. 需要最大量采血，要争取延长小鼠心脏有效工作时间，使更多血液进入外周循环同时防止凝血。 7. 若使用抗凝剂，需第一时间让血液接触抗凝剂。 8. 功能采血，要选择特殊的采血方式，例如，测试出凝血功能，必须避免和减小损伤血管内皮。 9. 普通采血操作力争简洁，避免溶血: 10. 需要麻醉的采血，首选异氟烷吸入麻醉，便于随时调整麻醉深度，最大限度减小麻醉药物对于血样的影响。 |
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2026-09-14 13:48:40, 299.98 K
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