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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » PCR产物琼脂糖凝胶电泳图问题求助
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木至文

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物琼脂糖凝胶电泳图问题求助

这是我用于切胶回收的胶图，顺序是第一个空是质粒反向PCR获得线性化片段跑胶（长度约6500bp），但是出现了许多的杂带且有一定的（拖尾？），我不确定这个现象怎么描述。第二个孔是Marker（2k），第三个孔是一个基因片段的扩增（1300bp左右），虽然是单一条带，但是也有类似拖尾的状态，不是非常清晰明亮的条带。胶孔中我加了100微升的PCR产物，电泳槽中的缓冲液是刚换的，电泳的条件是150V，20min。琼脂糖凝胶是20毫升缓冲液中加了0.2g的琼脂糖。用的unifi的P酶（一个牌子的高保真酶，但是我不记得具体信息了）。PCR模板用的是之前PCR获得的纯化产物，260/280在1.8-2.0之间，260/230不在1.8-2.0之间。还有什么需要我补充的条件吗。我想知道这个跑胶结果为什么会是这样，我要怎么样获得单一条带，我需要扩增出片段来进行拼接
@天使托 发自小木虫手机客户端
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1楼 2026-09-14 00:40:13
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木至文

新虫 (初入文坛)
PCR产物琼脂糖凝胶电泳图问题求助
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2楼2026-09-14 00:41:29
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