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木至文

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物琼脂糖凝胶电泳图问题求助

这是我用于切胶回收的胶图,顺序是第一个空是质粒反向PCR获得线性化片段跑胶(长度约6500bp),但是出现了许多的杂带且有一定的(拖尾?),我不确定这个现象怎么描述。第二个孔是Marker(2k),第三个孔是一个基因片段的扩增(1300bp左右),虽然是单一条带,但是也有类似拖尾的状态,不是非常清晰明亮的条带。胶孔中我加了100微升的PCR产物,电泳槽中的缓冲液是刚换的,电泳的条件是150V,20min。琼脂糖凝胶是20毫升缓冲液中加了0.2g的琼脂糖。用的unifi的P酶(一个牌子的高保真酶,但是我不记得具体信息了)。PCR模板用的是之前PCR获得的纯化产物,260/280在1.8-2.0之间,260/230不在1.8-2.0之间。还有什么需要我补充的条件吗。我想知道这个跑胶结果为什么会是这样,我要怎么样获得单一条带,我需要扩增出片段来进行拼接
@天使托 发自小木虫手机客户端
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木至文

新虫 (初入文坛)

2楼2026-09-14 00:41:29
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