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科研战神来了新虫 (小有名气)
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C57 繁育难？这份繁殖攻略小白亲测有效！
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一、合笼前，先把基础打牢① 确认品系、基因型和谱系 先明确每只鼠的基因型：flox/+、flox/flox、Cre阳性还是阴性。做好记录，避免后面配错。② 公鼠和雌鼠周龄要合适 C57小鼠性成熟大约6—8周。雌鼠推荐8周龄后再合笼，首胎存活率会更好。公鼠建议8—12周龄开始配种，太年轻或太老都可能影响受孕。③ 新到鼠先适应环境 新进鼠不要立刻合笼，先适应5—7天。观察精神状态、采食饮水、粪便和生殖器发育。④ 检查体况 过肥、过瘦、脱毛、腹泻、呼吸异常的都先调整。雌鼠阴道开口、公鼠睾丸下降情况也要看。⑤ 准备繁殖笼 笼内放木屑或玉米芯，加足筑巢材料。给繁殖料和干净饮水。笼卡写清品系、基因型、合笼日期、父母信息。⑥ 合笼时间选傍晚 小鼠夜间活动多，傍晚合笼更符合节律。合笼后尽量少抓少扰。 二、合笼催生小技巧① 保证受孕雌鼠周龄合适 C57雌鼠性成熟在6—8周，但推荐8周龄后再合笼。太早怀孕，首胎存活率可能明显下降⬇️。② 抓住产后“血配” 如果第二天发现母鼠产仔，公鼠可以暂时留在笼内。刚生产的母鼠受孕概率会更高，但代价是损伤母鼠。 前提：一定要有另外的母鼠可以带崽。尽量不要让公鼠带崽，效果往往不理想。体况差的母鼠不建议连续血配。③ 一雄多雌合笼 一个笼子可以1只雄鼠配2—3只雌鼠，提高受孕率。比例不要超过1:3，否则雄鼠疲劳、雌鼠竞争都会影响结果。 除非死亡或不孕，不要频繁更换配偶。一组繁殖笼可以长期用下去，制造稳定的繁殖环境。④ 查栓和记录 合笼后每天早晨查阴道栓。见栓当天可记为妊娠0.5天，C57妊娠期约19—21天。 不见栓不代表没配上，继续观察腹部和体重变化。⑤ 稳定配偶 频繁换笼、换公鼠、换垫料，都会让鼠群紧张。繁殖笼稳定下来，产仔率往往更稳。三、孕鼠管理① 吃仔常来自焦虑和营养不良 母鼠产后可能吃仔，头胎更常见。比起鸡蛋，我觉得补充葵花籽和果冻更顺手。 网上可以搜仓鼠用的山羊奶果冻，少量给，选正规产品，用甜食缓解孕鼠焦虑。高脂葵花籽有利于泌乳，但别过量，避免母鼠过肥。 饮水、饲料要充足，缺料缺水、噪音、高温、拥挤、公鼠骚扰也可能诱发吃仔。② 小鼠生产后，按兵不动 另一个吃仔原因是环境变动。母鼠受惊后可能吃仔或弃仔。 手套本身没味道，但你的手套往往会沾气味而不自知。生产后三天尽量不要换垫料、不要抓鼠、不要移动笼子。③ 给予良好的生产环境 现在很多动物房用玉米芯。用木屑时，母鼠会更有安全感，也更容易做窝。木屑要无尘、无香、无树脂。 如果没有木屑，可以给紫外照射过的纸巾或脱脂棉球，让母鼠做窝。④ 预产期前后少打扰 妊娠19—21天，腹部明显变大，乳头可见。预产前加足巢材，保持安静。 产后三天后换垫料也建议局部换，保留一部分旧垫料和巢材，减少气味突变。⑤ 准备代乳母鼠 血配或母鼠母性差时，代乳母鼠很重要。代乳母鼠要同期产仔、母性好、奶水足。寄养时尽量混合同日龄仔鼠，涂抹代乳母鼠笼内垫料，减少排斥。 四、仔鼠管理① 21天离乳 三周后可以离乳。此时也可以剪脚趾编号，顺带取组织做基因鉴定，及时分笼进入下一步繁殖。 剪脚趾、耳标等操作按机构伦理批准执行，必要时麻醉或镇痛。② 基因鉴定要跟上 PCR鉴定flox、Cre等位点。每只鼠都要有编号、性别、基因型、父母和笼号记录。 基因型不明或弱阳性的鼠，不要轻易投入繁殖。③ 尽量不要同窝兄妹交配 C57是近交系，已经承受了最初的近交衰退。持续、极密切的近亲交配仍可能带来繁殖性能下降、仔鼠体质弱、生理缺陷等问题。 扩繁时优先选不同窝、血缘较远的同品系个体。若为保种维持近交系，按品系规定执行并记录谱系。④ 分笼和密度 离乳后按性别、基因型分笼。每笼3—5只，避免拥挤。继续给繁殖料或高营养饲料一周，帮助仔鼠过渡。 五、 flox/+和Cre的扩繁路线① 先分别扩繁基础群 flox/+ × flox/+，可以获得flox/flox。 Cre阳性 × C57，可以扩繁Cre阳性鼠。 基础群稳定后，再按目标基因型配。② 再按目标基因型交配 如果目标是flox/flox;Cre+，常用路线是： 先得到flox/flox，再与Cre+交配；或者用flox/+;Cre+互交，根据后代基因型筛选。 具体看你的实验设计，不要一上来把所有鼠混在一个繁殖笼里。③ 首建鼠或嵌合鼠先回交 如果是CRISPR首建鼠、嵌合鼠，先与C57回交，获得稳定遗传背景，再做后续扩繁。④ 保种和冷冻 重要品系定期冷冻胚胎或精子，避免遗传漂变和意外断种。每代保留谱系记录。六、繁殖笼长期管理① 记录 合笼日期、见栓日期、产仔日期、产仔数、离乳数、性别、基因型、父母信息，都要写清。② 淘汰 连续2—3胎无仔、反复吃仔、母性差、雄鼠不育的，考虑淘汰或调整配对。③ 环境 温度20—26℃，湿度40%—70%，12/12小时光照，噪音低。繁殖笼尽量放在安静、少人走动的架位。④ 卫生 产后三天不换垫料。之后局部换，保留旧垫料和巢材。避免香味消毒剂和强刺激性气味。⑤ 少打扰 查栓、换笼、称重都集中做，动作轻。繁殖鼠不需要每天翻来翻去。 |
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