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新虫 (小有名气)

[交流] C57 繁育难?这份繁殖攻略小白亲测有效!

一、合笼前,先把基础打牢① 确认品系、基因型和谱系
先明确每只鼠的基因型:flox/+、flox/flox、Cre阳性还是阴性。做好记录,避免后面配错。② 公鼠和雌鼠周龄要合适
C57小鼠性成熟大约6—8周。雌鼠推荐8周龄后再合笼,首胎存活率会更好。公鼠建议8—12周龄开始配种,太年轻或太老都可能影响受孕。③ 新到鼠先适应环境
新进鼠不要立刻合笼,先适应5—7天。观察精神状态、采食饮水、粪便和生殖器发育。④ 检查体况
过肥、过瘦、脱毛、腹泻、呼吸异常的都先调整。雌鼠阴道开口、公鼠睾丸下降情况也要看。⑤ 准备繁殖笼
笼内放木屑或玉米芯,加足筑巢材料。给繁殖料和干净饮水。笼卡写清品系、基因型、合笼日期、父母信息。⑥ 合笼时间选傍晚
小鼠夜间活动多,傍晚合笼更符合节律。合笼后尽量少抓少扰。
二、合笼催生小技巧① 保证受孕雌鼠周龄合适
C57雌鼠性成熟在6—8周,但推荐8周龄后再合笼。太早怀孕,首胎存活率可能明显下降⬇️。② 抓住产后“血配”
如果第二天发现母鼠产仔,公鼠可以暂时留在笼内。刚生产的母鼠受孕概率会更高,但代价是损伤母鼠。
前提:一定要有另外的母鼠可以带崽。尽量不要让公鼠带崽,效果往往不理想。体况差的母鼠不建议连续血配。③ 一雄多雌合笼
一个笼子可以1只雄鼠配2—3只雌鼠,提高受孕率。比例不要超过1:3,否则雄鼠疲劳、雌鼠竞争都会影响结果。
除非死亡或不孕,不要频繁更换配偶。一组繁殖笼可以长期用下去,制造稳定的繁殖环境。④ 查栓和记录
合笼后每天早晨查阴道栓。见栓当天可记为妊娠0.5天,C57妊娠期约19—21天。
不见栓不代表没配上,继续观察腹部和体重变化。⑤ 稳定配偶
频繁换笼、换公鼠、换垫料,都会让鼠群紧张。繁殖笼稳定下来,产仔率往往更稳。三、孕鼠管理① 吃仔常来自焦虑和营养不良
母鼠产后可能吃仔,头胎更常见。比起鸡蛋,我觉得补充葵花籽和果冻更顺手。
网上可以搜仓鼠用的山羊奶果冻,少量给,选正规产品,用甜食缓解孕鼠焦虑。高脂葵花籽有利于泌乳,但别过量,避免母鼠过肥。
饮水、饲料要充足,缺料缺水、噪音、高温、拥挤、公鼠骚扰也可能诱发吃仔。② 小鼠生产后,按兵不动
另一个吃仔原因是环境变动。母鼠受惊后可能吃仔或弃仔。
手套本身没味道,但你的手套往往会沾气味而不自知。生产后三天尽量不要换垫料、不要抓鼠、不要移动笼子。③ 给予良好的生产环境
现在很多动物房用玉米芯。用木屑时,母鼠会更有安全感,也更容易做窝。木屑要无尘、无香、无树脂。
如果没有木屑,可以给紫外照射过的纸巾或脱脂棉球,让母鼠做窝。④ 预产期前后少打扰
妊娠19—21天,腹部明显变大,乳头可见。预产前加足巢材,保持安静。
产后三天后换垫料也建议局部换,保留一部分旧垫料和巢材,减少气味突变。⑤ 准备代乳母鼠
血配或母鼠母性差时,代乳母鼠很重要。代乳母鼠要同期产仔、母性好、奶水足。寄养时尽量混合同日龄仔鼠,涂抹代乳母鼠笼内垫料,减少排斥。 四、仔鼠管理① 21天离乳
三周后可以离乳。此时也可以剪脚趾编号,顺带取组织做基因鉴定,及时分笼进入下一步繁殖。
剪脚趾、耳标等操作按机构伦理批准执行,必要时麻醉或镇痛。② 基因鉴定要跟上
PCR鉴定flox、Cre等位点。每只鼠都要有编号、性别、基因型、父母和笼号记录。
基因型不明或弱阳性的鼠,不要轻易投入繁殖。③ 尽量不要同窝兄妹交配
C57是近交系,已经承受了最初的近交衰退。持续、极密切的近亲交配仍可能带来繁殖性能下降、仔鼠体质弱、生理缺陷等问题。
扩繁时优先选不同窝、血缘较远的同品系个体。若为保种维持近交系,按品系规定执行并记录谱系。④ 分笼和密度
离乳后按性别、基因型分笼。每笼3—5只,避免拥挤。继续给繁殖料或高营养饲料一周,帮助仔鼠过渡。
五、 flox/+和Cre的扩繁路线① 先分别扩繁基础群
flox/+ × flox/+,可以获得flox/flox。
Cre阳性 × C57,可以扩繁Cre阳性鼠。
基础群稳定后,再按目标基因型配。② 再按目标基因型交配
如果目标是flox/flox;Cre+,常用路线是:
先得到flox/flox,再与Cre+交配;或者用flox/+;Cre+互交,根据后代基因型筛选。
具体看你的实验设计,不要一上来把所有鼠混在一个繁殖笼里。③ 首建鼠或嵌合鼠先回交
如果是CRISPR首建鼠、嵌合鼠,先与C57回交,获得稳定遗传背景,再做后续扩繁。④ 保种和冷冻
重要品系定期冷冻胚胎或精子,避免遗传漂变和意外断种。每代保留谱系记录。六、繁殖笼长期管理① 记录
合笼日期、见栓日期、产仔日期、产仔数、离乳数、性别、基因型、父母信息,都要写清。② 淘汰
连续2—3胎无仔、反复吃仔、母性差、雄鼠不育的,考虑淘汰或调整配对。③ 环境
温度20—26℃,湿度40%—70%,12/12小时光照,噪音低。繁殖笼尽量放在安静、少人走动的架位。④ 卫生
产后三天不换垫料。之后局部换,保留旧垫料和巢材。避免香味消毒剂和强刺激性气味。⑤ 少打扰
查栓、换笼、称重都集中做,动作轻。繁殖鼠不需要每天翻来翻去。
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