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移液器混匀后吸头挂液滴，是没排干净吗？
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移液枪完成一批样品混匀后，按下排液键释放液体，常会观察到吸头尖端挂着一小液滴，反复轻甩也无法脱落。不少实验人员，尤其是新手，会因此产生顾虑：怀疑液体没有完全排净，担心移取体积出现偏差，也会担心是自己操作按压不到位、手抖操作失误导致。 先给结论：吸头挂着的那滴残液，绝大多数情况是移液器本身的设计特性，再加上排液档位没有按到底造成的，和手不手抖基本没关系。把原理弄明白，之后做混匀排液就不用总心里犯嘀咕。 我们日常用的都是空气置换式移液器，原理很简单：按下顶部按键，将枪筒内的空气压出；松开按键，依靠大气压的作用，液体就会被压进吸头，补齐空气排空后留出的空间。你设置多大体积，就会排出对应体积的空气，进而吸入同等体积的液体。 问题根源就在吸头尖端。液体会润湿塑料吸头内壁，容易挂在管壁上；尖端那一小滴靠着表面张力吊在管口，不会自动掉落。 空气置换移液器做体积标定的时候，早已把尖端这滴残留算进系统误差。按到第一档排出来的，就是你设定的目标体积，尖端这点残留是设计上就预留的，只要误差不超标，仪器就是正常可用的。 那为什么做完混匀，残液看着格外突出？混匀就是不停反复吸排液体，相当于把吸头反复润洗多遍。正式移液前润洗 2‑3 次是好习惯，内壁预先挂上一层液膜，还能减少移液残留。但混匀属于额外的多次循环，会让内壁液膜越积越厚，排完液之后，吸头看上去残留就会比平时严重很多。 不过有个关键点一定要搞明白，不能理解得太绝对。“不用按第二档，体积也准确” 是有条件的，只适用于普通水相样品。 如果是粘稠液体、加了表面活性剂，或是易挥发的试剂，吸头实际残留会比仪器标定的死体积大很多。这时不按第二档吹液，就会实实在在出现移液体积不足，该按到底还是要按。 另外第二档本身还有一个功能，就是把吸头内部液体彻底排干净。如果一根吸头连续移多份样品，不吹净残留就容易把上一个样品带入下一份，产生交叉污染。 所以样品需要反复转移，或是样品珍贵、惧怕污染的时候，养成按第二档排空吸头的习惯依旧很有必要。 不过有个关键点一定要搞明白，不能理解得太绝对。“不用按第二档，体积也准确” 是有条件的，只适用于普通水相样品。 如果是粘稠液体、加了表面活性剂，或是易挥发的试剂，吸头实际残留会比仪器标定的死体积大很多。这时不按第二档吹液，就会实实在在出现移液体积不足，该按到底还是要按。 另外第二档本身还有一个功能，就是把吸头内部液体彻底排干净。如果一根吸头连续移多份样品，不吹净残留就容易把上一个样品带入下一份，产生交叉污染。 所以样品需要反复转移，或是样品珍贵、惧怕污染的时候，养成按第二档排空吸头的习惯依旧很有必要。 毕合生物提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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