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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】做荧光衍生化反应，峰分为两个峰了
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songyt

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】做荧光衍生化反应，峰分为两个峰了

用液相做荧光衍生化分析。只测一种氨基酸的含量，用的衍生化试剂是NBD-F。但是分析时，一个峰分为了两个峰，而且两个峰靠的特别近。难道是NBD-F量太多了吗？另外一个峰是NBD-F的单体吗？
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1楼 2009-11-20 11:01:02
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songyt

金虫 (初入文坛)
我后来又跑了一针空白的，就是不加氨基酸。其他条件基本一样。色谱中也出现了一个很大的峰。怎么样让这个峰不出现呢？是因为NBD-F量太多了吗？或者衍生化反应不完全。
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2楼2009-11-20 15:50:44
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songyt

金虫 (初入文坛)
请大家帮忙了
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3楼2009-11-20 15:51:57
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songyt

金虫 (初入文坛)
有没有牛人帮我解答一下
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4楼2009-11-20 20:10:36
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chinabull

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
happy169(金币+2,VIP+0):谢谢参与，欢迎常来分析版 11-21 07:48
songyt(金币+1,VIP+0): 11-21 09:00
如果真是衍生化试剂的峰，是不能消除的，只能通过改变分离条件或者检测条件将其与被分析物分开。这个可以通过改变流动性实现，另外，可以考虑通过提取将衍生化试剂除掉。
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5楼2009-11-20 20:50:29
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hustyookie

金虫 (正式写手)
★ ★
happy169(金币+1,VIP+0):谢谢参与，欢迎常来分析版 11-21 08:08
songyt(金币+1,VIP+0):90 11-21 08:59
衍生反应时，衍生试剂过量是必须的，建议改变流动相组成，加大水的比例，很容易分开的
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6楼2009-11-21 07:56:21
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songyt

金虫 (初入文坛)
我做了一个对照试验。不加要测定的氨基酸，只加硼酸和NBD-F，信号强度比只有NBD-F的单体化合物测的荧光活性要强。这是为什么？难道硼酸会和NBD-F发生反应吗？硼酸有增强荧光信号的作用吗？谢谢
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7楼2009-11-21 09:15:57
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