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柱层析用久了峰形越来越宽，大家一般怎么判断是该重装还是该换新填料了？
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| 验室做柱层析大半年了，最近几次纯化目标蛋白的时候峰形明显比之前宽了不少，相邻的两个峰都快分不开了，流速也感觉比刚装柱的时候慢了一些。样品前处理该过的膜也都过了，流动相也是现配现用的，实在想不通是哪里出了问题。你们遇到这种分离效果下降的情况时，一般是先尝试反冲清洗一下柱头看看能不能救回来，还是说直接挖掉柱头那层填料重新装一下，还是说用了几十次之后填料的分离能力本身就衰减了只能换新的了？另外如果重装的话，填料的压缩比一般怎么控制比较合适？ |
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