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漫迹

金虫 (小有名气)

[交流] 质粒PstⅠ和SacⅡ双酶切

我想对质粒和目的片段进行PstⅠ和SacⅡ双酶切来构建新的质粒,用宝生物的酶,但两种酶的缓冲液不同,前者是H,后者是T+BSA,不知道怎么做好些,除了先用一个酶切,切胶回收后用另一个酶切的分布酶切法,有没有更好的办法,还请大家给点建议,呵
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sandra2128

金虫 (小有名气)


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你是不是可以分别单用一种酶使用它最适合的缓冲液来进行酶切目的片段,然后将2个酶切的结果进行片段比对,能不能得到质粒片段序列?然后再去构建?
以前学过,大概记得这么点,非专业水平,望见谅!
静而后能安;安而后能思;思而后能得。
2楼2009-11-18 20:30:43
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09021122

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议用最普通的缓冲液试下,这样两个就可以一起酶切
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
3楼2009-11-18 21:56:09
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
Fermentas的很多酶共用一种buffer
4楼2009-11-18 22:04:38
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竹子2225

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有一个表格,可是查到两个酶的公用Buffer,但我没有,从一个师兄那见过,你可以去找一下....
5楼2009-11-18 23:14:22
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heismeng

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
NEB有个universal buffer的查询 你到网页上看看 我本来想在我的资料中给你查的
但是我没找到sac ii 很不常见?
6楼2009-11-19 11:13:00
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