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科研战神来了新虫 (小有名气)
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[交流]
抗体开发的五种关键技术
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| 每种方法都通过不同的免疫、筛选或计算手段来实现单克隆抗体的制备：(a)小鼠杂交瘤技术：用目标抗原对小鼠进行免疫处理，然后将脾脏中的B细胞与永生化骨髓瘤细胞融合，从而获得杂交瘤细胞。接着通过筛选能够产生特定抗体的杂交瘤细胞，并通过对互补决定区（CDR）进行改造来使抗体具有更佳的人源化特性。(b)噬菌体展示技术：首先构建出由单链可变片段（scFv）、抗原结合片段（Fab）或单结构域抗体（VHH）构成的抗体文库。然后通过多轮生物筛选，从这些抗体中挑选出亲和力高的抗体，进而对其进行进一步处理以获得IgG形式的抗体。(c)转基因小鼠模型：利用基因工程手段培育出能表达人类免疫球蛋白基因的小鼠，再用目标抗原对其进行免疫处理。从脾脏中分离出能够产生人类抗体的B细胞，经过筛选后即可获得完全人源化的抗体。(d)单个B细胞的分离与利用：从接受过免疫治疗的患者身体中，采集外周血单个核细胞（PBMCs）。利用荧光激活细胞分选技术（FACS）分离出特异性B细胞，随后通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增对应的抗体基因，再将这些基因克隆到表达载体中，从而获得完全人源化的抗体。(e)从头设计抗体：利用人工智能（AI）和基于结构的建模技术，根据预先设计的框架结构来计算机生成抗体序列。之后将生成的抗体进行表达，并通过实验验证其亲和力、稳定性和功能。 |
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