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HE染色全流程,轻松掌握! HE染色,全称为“酸性-碱性-酸性染色”(Hematoxylin-Eosin staining),是一种在组织学研究和病理学诊断中广泛使用的染色方法。通过这种方法,细胞核会被染成深蓝色,而胞质则会被染成粉红色,从而清晰地显示出不同的细胞结构和组织类型。以下是HE染色的详细步骤: 组织固定 ? 首先,将待染色的组织标本进行固定,常用的固定剂包括福尔马林和乙醛。福尔马林的浓度通常为10%至20%,而乙醛的浓度则为3%至4%。 脱水 ? 接下来,通过一系列浓度递增的乙醇溶液进行脱水处理,使组织中的水分逐渐被乙醇替代。这个过程通常使用70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇和绝对乙醇等。 渗透 脱水后的组织标本需要通过一系列浓度递增的透明剂(如二甲苯)进行渗透处理,使乙醇逐渐被透明剂替代。这个过程通常使用100%二甲苯。 浸染 将渗透后的组织标本浸入含有血染色剂(如血红素)的染色液中,使细胞核染色成深蓝色。 脱色 ? 染色后的组织标本需要通过一系列浓度递减的酒精溶液或酸性溶液进行脱色处理,以去除剩余的染色剂。脱色剂通常使用酒精溶液或酸性溶液,酒精溶液的浓度递减,如95%乙醇、80%乙醇和70%乙醇等,酸性溶液可以使用酸性醇溶液或酸性醋酸溶液。 洗涤 用清水洗涤脱色后的组织标本,去除残留的脱色剂。 酸性染色 将洗涤后的组织标本浸入含有酸性染色剂(如酸性洋红)的染色液中,使胞质染色成粉红色。 再次脱色 ? 染色后的组织标本需要通过一系列浓度递减的酒精溶液或酸性溶液进行脱色处理,以去除剩余的染色剂。脱色剂通常使用酒精溶液或酸性溶液,酒精溶液的浓度递减,如95%乙醇、80%乙醇和70%乙醇等,酸性溶液可以使用酸性醇溶液或酸性醋酸溶液。 清洗 用清水洗涤脱色后的组织标本,去除残留的脱色剂。 去水 将清洗后的组织标本通过一系列浓度递减的乙醇溶液进行去水处理,使透明剂逐渐被乙醇替代。 再次渗透 将去水后的组织标本通过一系列浓度递减的透明剂进行渗透处理,使乙醇逐渐被透明剂替代。 封片 最后,将渗透后的组织标本置于透明剂中,然后固定在玻片上,并加上透明胶封闭,使组织标本固定在玻片上以便观察。 通过HE染色,可以在显微镜下观察组织标本的细胞结构和组织类型,从而帮助诊断疾病和研究组织学特征。 发自小木虫IOS客户端 |
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