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llzhang2012

[交流] PCR问题

请问跑PCR时,延伸时间设短了,有没有可能跑出目的条带?
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小小豆豆

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那就要看你所需要的片段的大小了,设定延伸时间短,大的片段是扩不出来的。呵呵
2楼2009-11-16 21:36:37
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smurfen

至尊木虫 (著名写手)

应该可以吧,只要不短的太离谱就行
Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
3楼2009-11-16 21:37:25
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xiaozi2964

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
跑跑电泳大体估计一下不就知道了吗?不行,就做做酶切嘛!!呵呵
4楼2009-11-16 21:55:46
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llzhang2012

引用回帖:
Originally posted by smurfen at 2009-11-16 21:37:
应该可以吧,只要不短的太离谱就行

谢谢,我的目的片断大概是1600pb和1300pb,跑电泳后目的片断处有条带,但是很暗,不知道是不是。按原理来说,延伸时间过短是不是得不到目的片断啊?我分子生物学学的不好,请指教,谢谢
5楼2009-11-17 09:40:09
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358219418

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很有可能是。暗的原因可能是延伸时间太短,合成量不够吧。最肯定的就酶切测序了
木虫,快乐并坚强着
6楼2009-11-17 09:54:34
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358219418

金虫 (正式写手)

很有可能是。暗的原因可能是延伸时间太短,合成量不够吧。最肯定的就酶切测序了
木虫,快乐并坚强着
7楼2009-11-17 09:55:00
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linxi8579

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得如果要酶切测序那一步,不如重做PCR了。前提是已经认为延伸时间短了,如果认为这可以证明你的问题倒是可以设一下,这样以后如果P的结果还是不好就可以排除这方面的原因分析了。所以如果楼主做的话欢迎分享啊哦
8楼2009-11-17 10:00:41
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09021122

木虫 (正式写手)

有可能啊 ,只要有延伸时间存在,就有可能有目的基因的存在
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
9楼2009-11-17 15:22:43
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zhouzhou_3006

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
也不一定哦,我有几次也把延伸时间设短了,本来是2.2 KB 左右的片段,一般我用的时间是2.15 min,那次就忘了改时间,用了1 min的,结果也p出来了,亮度和以前没什么区别
为梦想努力。
10楼2009-11-17 21:57:56
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