24小时热门版块排行榜    

查看: 735  |  回复: 4
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

狼狼晴空

木虫 (著名写手)

[交流] 郁闷的细胞培养!复苏后。。。。

最近一两个月,我和师姐养的MCF-7细胞总是夭折!
复苏后第一天成团,第三天就看不到细胞了,但是在培养皿底部铺着一层像是细沙状的淡黄色的东西,应该不是细菌。培养基颜色没改变。
细胞是今年5月份冻存的,在-80摄氏度冰箱。
之前有一批细胞复苏后长满瓶,状态还可以,但是传代后也成上面那样了,没有细胞了,只有细沙状东西。
另外,新配置培养液在4摄氏度冰箱里放置,颜色变紫,应该是碱性了,有的文献说可以放在培养箱中纠正Ph值,,放半个小时怎么感觉没什么太大改变呢?老师让重新调整pH,不能每次用都调吧,调了就得重新过滤除菌,,很麻烦的!!!
郁闷啊,老师催的紧,却找不到问题根源!
望大家帮忙啊!

[ Last edited by 狼狼晴空 on 2009-11-16 at 09:07 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)


狼狼晴空(金币+1,VIP+0):是啊,正在想这可能是主要原因吧。 11-16 18:15
-80摄氏度冰箱不能长期放吧
3楼2009-11-16 10:37:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


狼狼晴空(金币+1,VIP+0):不知道。支原体污染无法简单的检查出来吧。 11-16 09:09
引用回帖:
Originally posted by 狼狼晴空 at 2009-11-15 22:25:
最近一两个月,我和师姐养的MCF-7细胞总是夭折!
复苏后第一天成团,第三天就看不到细胞了,但是在培养皿底部铺着一层像是细沙状的淡黄色的东西,应该不是细菌。培养基颜色没改变。
细胞是今年5月份冻存的,在- ...

是不是有支原体污染呢?
2楼2009-11-15 23:59:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fwks3518

木虫 (正式写手)


狼狼晴空(金币+1,VIP+0):可以试试看。谢谢哦。 11-16 18:18
狼狼晴空(金币+1): 2010-03-06 20:17
先不要扔培养瓶,继续在培养箱放置一段时间,有时候也能恢复过来的。
可能的原因除了上面所说的支原体感染之外,可能跟冻存时细胞活力太低有关,建议复苏时加大FBS含量到20%试试,并加入双抗,24小时后观察、换液。
4楼2009-11-16 12:32:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqsvery

木虫 (著名写手)


狼狼晴空(金币+1,VIP+0):支原体检测看来很麻烦。不如去弄新细胞比较方便吧呵呵。 11-16 18:19
你这个照片拍的不是很清晰,不过看上去真的有点像是污染了,支原体污染检测你可以看看这个:

http://www.bioon.com/experiment/showarticle.asp?articleid=80858(有图参照)
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
5楼2009-11-16 13:45:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +40 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 42/2100 2026-08-14 00:15 by Nc5Ys9F5ntlw
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +9 Tide man 2026-08-10 10/500 2026-08-13 20:33 by 温淼淼淼
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见