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寡核苷酸合成，谁偷走了我的产量？
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每次收到合成好的引物，管壁上那点干巴巴的粉末，都让我怀疑人生——明明投了那么多物料，最后就收回这么点儿？ 问了一圈才发现，寡核苷酸合成的终产量本来就是个玄学。偶联效率从99%掉到98%，30个碱基的产物直接砍半。脱保护那步没控制好，碱基掉几个；纯化的时候再切一刀，最后能剩25%就算烧高香了。 最近试了一批硫代修饰，偶联效率直接拉胯到90%出头。纯化后的回收率更是惨不忍睹，HPLC上目标峰小小的，杂峰倒是挺热闹。 也试过换进口试剂、加分子筛脱水、提前校准仪器，折腾一圈下来，产量确实稳了一点点，但还是远远低于理论值。 想问问搞寡核苷酸合成的同行，你们实际回收率大概有多少？有没有什么提高产量的偏方？特别是做长链或者修饰的时候，怎么才能少损失点？ |
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