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xiangao

金虫 (正式写手)

[交流] RT-PCR

为什么反转录后进行PCR,p不出目的条带?  反转录完后跑电泳是弥散的一片，应该正常的吧？、
上次p出来结果测序发现是基因组污染了，然后就用Dnase I处理，再进行RT-PCR,结果就是p不出目的带。
请高手指点？
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1楼 2009-11-14 09:50:43
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-14 13:28
xiangao(金币+2,VIP+0): 11-14 18:56
逆转录后的cDNA pool自然是smear
P不出条带？内参呢？如果内参出不来是你的逆转录或者提RNA就出问题了
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2楼2009-11-14 12:46:32
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pidou

木虫 (正式写手)
我的也没有P出来，最后只有引物的模糊条带，你说的内参怎么做呢？
能详细一点说一下吗？
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-11-14 12:46:32:
逆转录后的cDNA pool自然是smear
P不出条带？内参呢？如果内参出不来是你的逆转录或者提RNA就出问题了

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3楼2010-04-01 00:05:30
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
毫无以为RNA降解了，rt时别忘了RNasin
赞一下 回复此楼
4楼2010-04-01 09:04:09
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