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liubang8355

金虫 (小有名气)

[交流] 细胞消化和24孔细胞培养咨询

我有两个问题请教下大家,希望有经验的指教下
1.我的细胞消化后大多数还是几个在一起的,很难分散成单细胞?是什么原因啊?
2.做24孔时,细胞怎么样才能分散均匀啊?我的要么是中间一团,要么是边缘紧挨着,希望大家帮忙指教
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


liubang8355(金币+1,VIP+0): 11-14 09:50
1、消化不完全,或没吹好,可用中枪吹
2、十字摇
2楼2009-11-13 23:19:22
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liubang8355

金虫 (小有名气)

我那样做了,还是不行啊.不知道为什么?胰酶不行了吗?
3楼2009-11-14 09:52:12
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 11-14 13:28
胰酶用了多久?我的配了两三个月照用无所谓
或者你的细胞难消化
那么消化之前就用PBS或者胰酶洗一下,然后再消化
制备单细胞悬液还算比较基础的操作
4楼2009-11-14 12:47:31
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suiliucai

金虫 (小有名气)


liubang8355(金币+1,VIP+0): 11-15 08:52
我也遇到类似的情况,不过我每次消化时多摇动了很多次,再去观察时,发现效果不错
5楼2009-11-14 19:24:26
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liubang8355

金虫 (小有名气)

都摇了啊
6楼2009-11-15 08:52:50
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11wl11

新虫 (初入文坛)


liubang8355(金币+1,VIP+0): 11-15 23:42
第一个问题:我觉得不是消化的不够,而是消化的过了~
第二个问题:一般摇一摇就好了~

[ Last edited by 11wl11 on 2009-11-15 at 19:42 ]
7楼2009-11-15 19:41:05
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


liubang8355(金币+1,VIP+0): 11-15 23:42
re楼上,消化过了是更加容易变成单细胞悬液
当然不排除消化过头的细胞漏出来的DNA缠绕细胞的情况,但是那种一般不会是细胞团
8楼2009-11-15 20:16:37
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liubang8355

金虫 (小有名气)

消化过了?
9楼2009-11-15 23:43:24
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11wl11

新虫 (初入文坛)

★ ★
liubang8355(金币+2,VIP+0): 11-19 10:22
我之前养的MC3T3细胞消化过了,吹下细胞后,肉眼可以看见细胞团。我才判断是消化过了~
10楼2009-11-16 13:57:57
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